Ac-SDKP pri zaščiti in obnovi organov: podatki o srcu, ledvicah, jetrih, živčnem sistemu in koži

Opis možnih učinkov fragmenta 4 (1-4) timozina beta (Ac-SDKP) na podlagi literature. (To ni opis izdelka, izjava o omejitvi odgovornosti je na dnu strani)

Ac-SDKP (N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin) je zelo majhen beljakovinski fragment, ki izhaja iz druge naravne beljakovine, imenovane timozin β4. V telesu posebni encimi razrežejo timozin β4 na manjše dele, eden od rezultatov tega procesa pa je Ac-SDKP [1]. Ta majhna molekula je pomembna, ker pomaga ščititi organe pred brazgotinjenjem (fibrozo), ki nastane, ko se po poškodbi ali bolezni nabere preveč togega tkiva. Težava je v tem, da Ac-SDKP v telesu ne zdrži dolgo.

- hitro razgradi encim, imenovan ACE (angiotenzin-konvertirajoči encim). Zanimivo je, da lahko zdravila, ki blokirajo ACE (kot so nekatera zdravila za hipertenzijo), do petkrat povečajo raven Ac-SDKP, kar poveča njegov zaščitni učinek [1].

Sprva so znanstveniki mislili, da je glavna vloga Ac-SDKP, da preprečuje prehitro rast krvnih matičnih celic. Novejše študije pa kažejo, da ima večjo vlogo pri celjenju in zaščiti tkiv. Pomaga zaustaviti prekomerno razraščanje brazgotinskega tkiva v organih, kot so srce, pljuča, jetra in ledvice. Zmanjšuje na primer aktivnost nekaterih signalov, zaradi katerih celice proizvajajo preveč kolagena (glavne beljakovine brazgotin), in preprečuje, da bi se obnovitvene celice (fibroblasti) spremenile v celice, ki tvorijo brazgotine. V primeru bolezni ledvic je Ac-SDKP resnično obetaven. Ne le, da pomaga ledvicam, da bolje delujejo, ampak tudi zmanjšuje brazgotinjenje, saj blokira dostop prevelikemu številu imunskih celic in blaži škodljive procese, ki običajno poslabšajo poškodbe. Skratka, zdravilo Ac-

SDKP v telesu deluje kot naravna molekula, ki preprečuje nastanek brazgotin in ščiti tkiva. Spodbuja celjenje, zmanjšuje vnetja in je lahko uporaben pri zdravljenju bolezni, pri katerih imajo pomembno vlogo brazgotinjenje in poškodbe tkiva.

Ac-SDKP ščiti srce (na podlagi študij na živalih)

Več znanstvenih študij je opisalo potencial Ac-SDKP za zdravje srca v nujnih in dolgoročnih primerih. Nakagawa in drugi so na mišjem modelu miokardnega infarkta dajali Ac-SDKP v odmerku 1,6 mg/kg/dan prek majhne podkožne črpalke in ugotovili jasne koristi: raztrganine srčne stene (rupture srca) so se zmanjšale z 51,0% na 27,3%, smrtnost pa s 56,9% na 31,8%. Zdi se, da peptid deluje tako, da pomirja imunske celice "prve pomoči", ki lahko poslabšajo poškodbe (makrofagi M1), medtem ko ne spreminja koristnih popravnih makrofagov (M2) ali nevtrofilcev. Upočasnil je tudi delovanje encima (MMP-9), ki razgrajuje srčno tkivo po infarktu, medtem ko je bil drug označevalec (MPO) nespremenjen, kar kaže na usmerjeno, namerno delovanje [2]. V primeru brazgotinjenja srca zaradi dolgotrajnega visokega krvnega tlaka so Peng in sod. pokazali, da lahko Ac-SDKP zmanjša obstoječe brazgotinsko tkivo in ga ne le prepreči. Pri podganah z uveljavljenim modelom hipertenzije je vsakodnevno dajanje Ac-SDKP v odmerku 400-800 µg/kg (podkožno) 8 tednov zmanjšalo količino kolagena v srcu - glavni znak brazgotinjenja - v odvisnosti od odmerka (večji odmerek je bil učinkovitejši). Krvni tlak sam po sebi se ni znižal, prav tako niso bili prizadeti normalni odzivi na angiotenzin I in bradikinin, tako da korist ni bila izključno posledica znižanja krvnega tlaka. Raven Ac-SDKP v krvi se je povečala za 2-5-krat, ključni signali, ki povzročajo brazgotinjenje v srcu (TGF-β in CTGF), pa so se zmanjšali, kar potrjuje neposreden učinek proti brazgotinjenju [3].

Po miokardnem infarktu lahko trajna oteklina in brazgotinjenje povzročita srčno popuščanje. Yang in sod. so testirali Ac-SDKP na začetku (za preprečevanje poškodb) in pozneje (za odpravljanje poškodb). V obeh primerih se je skupna vsebnost kolagena v srcu zmanjšala (na primer s ~24 na ~15 µg/mg v skupini za preprečevanje in s ~23 na

~14 µg/mg v skupini, ki je uporabila obratno metodo). Zmanjšalo se je tudi škodljivo kopičenje imunskih celic: število makrofagov se je v vsaki skupini zmanjšalo za približno tretjino, vzporedno pa se je zmanjšalo tudi število TGF-β-pozitivnih celic. Te koristi so bile dosežene brez znižanja krvnega tlaka ali zmanjšanja velikosti srca, črpalna moč pa se v skupini za profilakso ni opazno izboljšala. Kljub temu stalno zmanjševanje brazgotinjenja in vnetja kaže na izboljšanje strukture srca v daljšem časovnem obdobju [4].

Ac-SDKP lahko pojasni tudi nekatere "dodatne" koristi za tkiva, ki jih opazimo pri zdravilih, ki zavirajo ACE. Rasoul in sod. so primerjali model hipertenzije, povzročene z angiotenzinom II, s skupinami, ki so prejemale kaptopril ali Ac-SDKP (400-800 µg/kg/dan). Ta je večkrat zvišal raven krvi in ponovil številne zaščitne lastnosti, podobne inhibitorjem ACE: manjša celična hipertrofija v srcu, manj makrofagov in mastocitov, nižje ravni TGF-β in CTGF ter manjše kopičenje kolagena. Pomembno je, da so se te koristi pojavile, ne da bi se znižal krvni tlak ali zmanjšala zgostitev srca, kar kaže na

neposreden zaščitni učinek na srčno tkivo [5]. Ac-SDKP upočasnjuje nastanek brazgotin v srcu na celični ravni. Rhaleb s sodelavci so v laboratoriju na gojenih srčnih podpornih celicah podgan (fibroblastih) testirali zelo nizke odmerke Ac-SDKP (0,05-100 nmol/l) in ugotovili dva ključna učinka: zmanjšanje rasti celic (kopiranje DNK) na normalno pri približno 1 nmol/l in zmanjšanje kolagena (glavnega proteina "brazgotine"), ki nastaja kot odziv na endotelin-1, močan signal za nastanek brazgotine. Pri kolagenu so bili najboljši manjši odmerki, zelo visoki odmerki pa so bili manj učinkoviti. Zdi se, da je peptid utišal pogost celični signal (p44/42 MAPK/ERK), enako korist pa je imel tudi znani blokator MAPK. Preprosto povedano, Ac-SDKP zapoveduje fibroblastom, da upočasnijo tako proliferacijo kot pretirano tvorbo brazgotin, verjetno z zmanjšanjem aktivnosti ključne poti rasti [6].

Poleg tega ščiti srce pred poškodbami, ki jih povzroča galektin-3. V študiji na odraslih podganah so Liu in drugi štiri tedne dajali galektin-3 (beljakovino, ki povzroča vnetje in brazgotinjenje) in opazili več vnetnih celic, debelejše srčne stene, hujše brazgotinjenje okoli žil in med celicami, višje ravni signalizacije TGF-β/Smad3 (pot, ki spodbuja brazgotinjenje) in šibkejše črpanje pri ehokardiografiji. Dodatek Ac-SDKP (800 µg/kg/dan) je preprečil večino teh sprememb: vnetne celice, brazgotinjenje in zadebelitev srčne stene so se zmanjšali, delovanje srca pa izboljšalo. Podatki kažejo, da ščiti srce z izklopom "stikala za brazgotinjenje" TGF-β/Smad3 in ublažitvijo vnetja [7]. Poleg tega zmanjšuje brazgotinjenje srca pri dolgotrajni hipertenziji, ne da bi spremenil sam krvni tlak. Na klasičnem žilnem modelu (2 ledvici, 1 objemka) pri podganah so Rhaleb in sod. dajali Ac-SDKP (400 µg/kg/dan, subkutano). Čeprav sta krvni tlak in hipertrofija srca ostala povišana, je zdravljenje s peptidom znatno zmanjšalo število vnetnih in proliferacijskih celic v miokardu. Pomembno je, da je normaliziral intersticijsko frakcijo kolagena in jo s približno 10,1% pri hipertenzivnih podganah zmanjšal na približno 5,4%, kar je skoraj enaka raven kot pri kontrolnih živalih (≈5,3%). Skratka, zmanjšal je škodljive tkivne spremembe, čeprav je tlačna obremenitev ostala nespremenjena, kar kaže na neposredno vlogo pri celjenju tkiv [8]. Poleg tega Ac-SDKP v kombinaciji s timozin-β4 spodbuja obnovo tkiv po miokardnem infarktu. Cavasin in sod. so v preglednem članku ugotovili, da timozin-β4 spodbuja migracijo in preživetje celic. Njegov derivat, Ac-SDKP, zagotavlja dodatne koristi, saj deluje kot antifibrotično sredstvo pri hipertenziji. Na modelih miokardnega infarkta se je izkazalo, da Ac-SDKP obrne nastanek brazgotin in zmanjša vnetje. Spodbujal je tudi angiogenezo, kar so pokazale študije in vivo in ex vivo. Poleg tega je Ac-SDKP pri miših zmanjšal tveganje za razpoko srčne stene, kar je poudarilo njegov terapevtski potencial pri obnovi srca in ožilja. Koristi se v veliki meri prekrivajo, kar kaže na to, da Ac-SDKP prenaša del terapevtskega učinka timozina β4. Vendar je raziskovalec omenil, da so za potrditev teh laboratorijskih rezultatov in študij na živalih še vedno potrebne študije na ljudeh [9].

Poleg tega Ac-SDKP zmanjša aktivnost encimov, ki razgrajujejo tkiva in jih sproži IL-1β. Rhaleb s sodelavci je v fibroblastih srca odraslih podgan pokazal, da interlevkin-1β (IL-1β), pro-vnetni citokin,

znatno povečalo izražanje matriksnih metaloproteinaz (MMP-2, MMP-9 in MMP-13). Ti encimi razgrajujejo sestavine zunajceličnega matriksa in prispevajo k neugodni remodelaciji. Ac-SDKP ni spremenil osnovnega izražanja MMP. Vendar pa je močno zaviral zvišanje ravni teh encimov, ki ga je povzročil IL-1β. Hkrati je Ac-SDKP povečal izražanje tkivnih zaviralcev metaloproteinaz (TIMP-1 in TIMP-2), naravnih zaviralcev aktivnosti MMP. To je pripomoglo k ponovnemu vzpostavitvi ravnovesja v matriksu. Ac-SDKP je tudi zmanjšal aktivacijo dveh glavnih signalnih poti, ki spodbujata vnetje in proliferacijo: NF-κB in ERK/MAPK. Zanimivo je, da stimulacija IL-1β v tem modelu ni povečala proizvodnje kolagena. Ac-SDKP prav tako ni vplival na sintezo kolagena. To kaže, da je njegova zaščitna vloga posledica selektivnega uravnavanja remodelacije tkiva in ne splošne spremembe v proizvodnji kolagena. Ti rezultati skupaj kažejo, da lahko Ac-SDKP ščiti miokard pred patološko remodelacijo s ponovnim uravnoteženjem regulacije matriksa [10].

Ac-SDKP ščiti pred avtoimunskimi poškodbami srca pri podganah. Pri modelu miokarditisa, povzročenega s T-celicami, so Nakagawa in sod. imunizirane Lewisove podgane zdravili z Ac-SDKP in opazili ohranitev srčne funkcije, tako sistolične kot diastolične. Zdravljenje je tudi zmanjšalo povečanje srca, zmanjšalo nastajanje brazgotin in ohranilo bolj zdravo strukturo miokarda. Histološka analiza je pokazala manjše število infiltrirajočih imunskih celic, vključno z makrofagi, dendritičnimi celicami in limfociti T. Hkrati so se znatno znižale ravni ključnih vnetnih mediatorjev, vključno s citokini (IL-1α, TNF-α, IL-2, IL-17), kemokini (CINC-1, IP-10), adhezijskimi molekulami (ICAM-1, L-selektin) in matričnimi metaloproteinazami. Zanimivo je, da Ac-SDKP ni spremenil ravni avtoprotiteles, specifičnih za miozin, ali antigensko specifičnih odzivov celic T. To kaže, da je njegov kardioprotektivni učinek predvsem posledica zmanjšanja rekrutacije imunskih celic in zaviranja vnetnih mediatorjev, ne pa spremembe proizvodnje avtoprotiteles ali aktivacije celic T [11].

Ac-SDKP zmanjšuje vnetje in tvorbo kolagenskih zamreženj pri hipertenziji, povzročeni z angiotenzinom II. González in drugi so podgane tri tedne zdravili z angiotenzinom II, posebno skupino pa so zdravili z Ac-SDKP. Krvni tlak in hipertrofija srca sta ostala povišana v obeh skupinah, vendar je Ac-SDKP preprečil povečanje skupnega kolagena in navzkrižno povezanega kolagena. Ta zaščitni učinek je bil posledica zaviranja mRNA lizila oksidaze (LOX) in beljakovine LOXL1, encimov, ki so odgovorni za zamreženje kolagena in strjevanje brazgotin. Poleg tega je Ac-SDKP zmanjšal izražanje TGF-β, zaviral aktivacijo NF-κB in zmanjšal infiltracijo limfocitov T CD4⁺ in CD8⁺ ter makrofagov CD68⁺ v srčno tkivo. Pomembno je, da je pritok celic CD4⁺ T koreliral z izražanjem LOXL1, kar kaže na mehanično povezavo med aktivnostjo imunskih celic in fibrozo. Te ugotovitve poudarjajo, da ima Ac-SDKP močne protifibrozne in protivnetne učinke neodvisno od svojega vpliva na krvni tlak [12].

Poleg tega ščiti srce po miokardnem infarktu pri miših v zgodnji in pozni fazi. Peng s sodelavci je po infarktu miokarda mišim C57BL/6J dajal Ac-SDKP (1,6 mg/kg/dan). V prvem tednu je zdravljenje zmanjšalo število smrtnih razpok stene, znižalo raven ICAM-1, zmanjšalo pritok makrofagov in aktivnost prebavljanja želatine, zaviralo p53 in zmanjšalo smrt miokardnih celic; hkrati se je povečalo število majhnih krvnih žil na robu poškodbe, kar kaže na boljšo rast novih žil. V petem tednu je bilo v srcih manj intersticijskega kolagena, ohranjena struktura, nižje ravni stresa endoplazemskega retikuluma (CHOP) in ohranjena SERCA2 (ključna za presnovo kalcija) ter na splošno boljše delovanje. Skratka, zmanjšuje zgodnje poškodbe in spodbuja bolj zdravo dolgoročno remodeliranje [13].

V drugi študiji je Ac-SDKP zmanjšal brazgotinjenje srca in izboljšal diastolično funkcijo pri diabetični kardiomiopatiji. Castoldi s sodelavci so pri podganah povzročili sladkorno bolezen in dva meseca pozneje osem tednov uporabljali Ac-SDKP (1 mg/kg/dan z mini črpalkami). Pri podganah s sladkorno boleznijo so se pojavile visoke vrednosti sladkorja, izrazita intersticijska in perivaskularna fibroza ter višje vrednosti TGF-β1 in fosfo-Smad2/3 v srcu. Ac-SDKP je zmanjšal obe vrsti fibroze in signalizacijo TGF-β/Smad, tudi pri živalih, ki so prejemale zaviralec ACE ramipril. Ultrazvok srca je pokazal, da je sladkorna bolezen poslabšala sistolo in diastolo; inzulin in ramipril sta obnovila obe funkciji, medtem ko je Ac-SDKP delno izboljšal diastolo (diastolično funkcijo). Ti podatki poudarjajo antifibrotično korist ob zmernem povečanju funkcije v tem modelu [14]. Poleg tega ščiti koronarne žile pred poškodbami zaradi sevanja in ohranja pretok krvi. Pri modelu podgan z obsevanjem prsnega koša so Sharma in sod. 18 tednov podkožno dajali Ac-SDKP. Sevanje je zmanjšalo pretok krvi v mirovanju, uničilo endotelijske celice, povečalo koronarno fibrozo in porušilo beljakovine tesnega spoja (claudin-1, JAM-2). S tem so ponovno vzpostavili normalen pretok krvi, ohranili endotelijske celice, zmanjšali fibrozo in obnovili tesne spoje. Laboratorijske študije so pokazale, da Ac-SDKP prodira v endotelijske celice in zmanjšuje raven reaktivnih kisikovih zvrsti, ki jih povzroča sevanje; pri živih živalih se je označen peptid v endotelijskih celicah skoncentriral v nekaj urah. Ti rezultati kažejo na zaščito žil, manjšo oksidativno poškodbo in boljšo mikrovaskularno integriteto po obsevanju [15]. Poleg tega zmanjšuje s stresom povzročeno nastajanje brazgotin v srčnih podpornih celicah. V človeških srčnih fibroblastih so celice predhodno obdelali z Ac-SDKP (10 nM) in jih nato obdelali s tunikamicinom (0,25 µg/ml), ki povzroči "beljakovinski stres" v celični tovarni (endoplazemski retikulum). Ac-SDKP je pomagal ustaviti stresne celice, da niso proizvajale preveč kolagena. Deloval je tako, da je umiril celični odziv na stres, zmanjšal aktivnost stresnega proteina, imenovanega CHOP, in aktivnost vnetnega stikala, imenovanega NF-κB. Znižal je tudi raven IL-6, signala, ki sproži vnetje. Ko je bil CHOP genetsko zmanjšan, je še naprej zmanjševal aktivnost NF-κB in kolagena tipa I na ravni beljakovin in mRNA, kar potrjuje isto pot [16]. Preprosto povedano: v stresnih razmerah to pomaga celicam, da se izognejo pretirani proizvodnji beljakovin brazgotin.

Poleg tega zmanjšuje vnetje žilne sluznice, ki ga povzroča TNF-α. V endotelijskih celicah človeške koronarne arterije je stimulacija TNF-α povzročila znatno povečanje izražanja ICAM-1. Ta adhezijska molekula ima ključno vlogo pri spodbujanju adhezije levkocitov na površino krvnih žil. Predhodno zdravljenje z Ac-SDKP je znatno zmanjšalo raven ICAM-1 v odvisnosti od odmerka. Mehanistična analiza je pokazala, da je bil ta učinek posredovan z zaviranjem signalne kaskade IKK → IκB → NF-κB, ki je ključna za aktivacijo izražanja vnetnih genov. Zanimivo je, da se dve drugi signalni poti, p38 MAPK in ERK, nista spremenili, kar kaže na to, da Ac-SDKP selektivno sodeluje s potjo NF-κB in tako deluje protivnetno na endotelijske celice [17]. Ac-SDKP pomaga ohranjati mirno stanje žilne sluznice in zmanjšuje njeno "lepljivost" med vnetjem. Poleg tega preprečuje brazgotinjenje velikih arterij pri hipertenziji, povzročeni z angiotenzinom II, tudi brez zniževanja samega tlaka. Pri podganah, zdravljenih z angiotenzinom II, je Ac-SDKP zmanjšal kopičenje kolagena v aorti in zmanjšal signale (mRNA kolagena tipa I in III), ki povzročajo brazgotinjenje. Zmanjšal je tudi prekomerno aktivnost proteinske kinaze C, oksidativni stres, ICAM-1 in vstop makrofagov v žilno steno. Signali fibroze so se zmanjšali (manjša aktivnost TGF-β1 in Smad2), naravni zaviralec te poti (Smad7) pa se je povečal. Krvni tlak in debelina aorte sta ostala visoka, tako da so bile te koristi za žilno steno posledica neposrednih učinkov na tkivo in ne sprememb tlaka [18].

Ac-SDKP ščiti srce tudi pred poškodbami zaradi sevanja. Pri podganah, ki so prejele usmerjeno obsevanje prsnega koša, je 18-tedensko jemanje Ac-SDKP ohranilo delovanje srca, zmanjšalo kopičenje zunajceličnega matriksa in fibrozo, zmanjšalo pritok makrofagov in zmanjšalo smrt srčnih celic. Zmanjšala se je tudi raven in sproščanje Mac-2 (galektin-3), makrofagnega proteina, ki je odgovoren za fibrozo. Ac-SDKP so opazili v makrofagih blizu celičnega jedra in je preprečil sprožitev Mac-2, ki jo sproži sevanje; ko fibroblasti niso imeli Mac-2, je sevanje povzročilo veliko šibkejše signale brazgotinjenja [19]. Z zmanjšanjem vnetja in nastajanja brazgotin pomaga ohranjati bolj zdravo ožilje in srčno tkivo po obsevanju.

Ac-SDKP za zdravje pljuč (na podlagi študij na živalih)

Ac-SDKP je na modelih pljuč pokazal močnejše antifibrotične učinke kot timozin-β4. Najprej je v laboratorijskih študijah z uporabo pljučnih celic ljudi z idiopatsko pljučno fibrozo (IPF) upočasnil prekomerno rast celic in zmanjšal dva signala fibroze, ki ju povzroča TGF-β: α-SMA in kolagen. Pri miših, ki so dobivale bleomicin za povzročitev poškodbe pljuč, je timozin-β4 pomagal v zgodnji fazi (7. dan) z zmanjšanjem vnetja in zgodnjega brazgotinjenja, vendar ni ustavil fibroze v poznejših fazah (14.-21. dan). Te ugotovitve kažejo, da Ac-SDKP blokira primarne faze brazgotinjenja v celicah in lahko zagotavlja stabilnejše in dolgotrajnejše protifibrozne učinke kot njegov predhodnik, timozin-β4 [20]. Poleg tega zavira brazgotinjenje pljuč, povezano s silicijevim dioksidom, z obnovitvijo KIF3A in izklopom signalizacije β-katenina.

. Zlasti pri silikozi je bila raven KIF3A nizka v vzorcih bolnikov in v pljučih podgan. Ko so ponovno vzpostavili KIF3A, se je zmanjšala aktivnost β-katenina in njegovih spodnjih gonilnikov MRTF-A in SRF, kar je upočasnilo prehod iz epitelija v miofibroblast (EMyT), ki je povezan z brazgotinjenjem. To je dosledno povečalo delovanje KIF3A in posledično zmanjšalo signalizacijo β-katenina/MRTF-A/SRF. Ko pa je bil KIF3A izločen, je Ac-SDKP izgubil te prednosti, kar potrjuje, da je KIF3A bistven za njegovo protifibrozno delovanje [21].

V drugi študiji je Ac-SDKP v kombinaciji z VIP ublažil spremembe, povezane s KOPB, ki jih je povzročilo kajenje cigaret pri miših. Zmanjšal je oksidativne poškodbe (nižja raven MDA), brazgotinjenje (nižja raven hidroksiprolina) in ključni dejavnik fibroze (nižja raven TGF-β). Hkrati so se zmanjšali vnetni citokini (TNF-α, IL-1β, IL-6) in izboljšala antioksidativna zaščita (večja aktivnost SOD). Skladno s tem je bilo v pljučnem tkivu pod mikroskopom manj vnetij in manj strukturnega preoblikovanja. Kombinacija teh snovi je zagotovila antioksidativne, protivnetne in antifibrozne koristi v modelu poškodbe zaradi dima [22, 23]. Ac-SDKP je pokazal pomembne rezultate tudi pri preprečevanju in zdravljenju pljučne fibroze, povzročene z bleomicinom. Pri miših CD-1 je Ac-SDKP (0,6 mg/kg, i.p.), ki so ga dajali od dneva 0 ali 7. dan je izboljšal preživetje in zmanjšal z bleomicinom povezano izgubo telesne teže. Poleg tega so bila pljuča manj otekla in manj invazivnih imunskih celic, bolj zdrava struktura tkiva in manjša fibroza: zmanjšala sta se tako barvanje kolagena kot tudi raven topnega kolagena. Mehanistično so se zmanjšali profibrozni signali IL-17 in TGF-β ter α-SMA, kar kaže na manjše število miofibroblastov. Pomembno je, da so se koristi pojavile tako pri zgodnjem (preventivnem) kot tudi pri poznejšem (terapevtskem) načinu zdravljenja [24]. Poleg tega prek poti P-HSP27/SNAI1 zmanjšuje pljučno fibrozo, ki jo povzroča silikoza. Pri podganah je silikoza povzročila povečanje P-HSP27, SNAI1, α-SMA in kolagena I/III v pljučnem tkivu. Nasprotno pa je Ac-SDKP - ki so ga dajali pred izpostavljenostjo ali po začetku bolezni - zmanjšal vse te označevalce in zmanjšal število celic, pozitivnih na P-HSP27 in α-SMA pri slikanju. Pomembno je, da njegovo dajanje zdravim kontrolam ni spremenilo izražanja beljakovin, kar kaže na to, da je njegov učinek selektiven za obolela pljuča [25].

Poleg tega je v več študijah na živalih pokazal močne antifibrotične učinke. Metaanaliza, ki je vključevala 18 randomiziranih študij (428 živali, 2008-2021), je pokazala, da je Ac-SDKP v primerjavi z nezdravljenimi modeli zmanjšal več signalov fibroze: α-SMA (SMD -2,44), kolagen tipa I (SMD -5,36), kolagen tipa III (SMD -3,07), TGF-β (SMD -2,88) in površino pljučnih vozlov (SMD

-1,80); vse P<0,001. Poleg tega se je znatno spremenil tudi hidroksiprolin, kemični podatek o kolagenu [SMD 7,62; 95% CI 4,90-10,33; P=0,000], kar je skladno z učinkom na obnavljanje kolagena. Ti rezultati kažejo, da Ac-SDKP dosledno upočasnjuje fibrozo na modelih pljučnih bolezni [26]. V drugi študiji je zmanjšal ravni TGF-β in CTGF ter zaviral brazgotinjenje pljuč, povezano s silicijevim dioksidom, pri podganah. Podgane so prejemale silicijev dioksid, ki je povzročil fibrozo, nato pa preventivno ali terapevtsko Ac-SDKP (800 µg/kg/dan). V primerjavi s kontrolno skupino za silikozo so se v zdravljenih pljučih znatno zmanjšale ravni beljakovin TGF-β1 (na ~0,244 ± 0,016) in CTGF (na ~0,241 ± 0,017). Podobno so se ravni mRNA

zmanjšala, mRNA CTGF pa je bila v primerjavi z modelnimi skupinami znatno nižja (P<0,05). V skupini za profilakso sta bili tako beljakovina kot mRNA za TGF-β1 znatno nižji od ravni v 8-tedenskem modelu silikoze (P<0,05). Nazadnje je tudi histološki pregled pljuč potrdil manjšo fibrozo [27]. Poleg tega zavira kopičenje kolagena in izboljša strukturo pljuč pri silikozi. Podgane, izpostavljene silikozi, so prejemale Ac-SDKP po poškodbi (zdravljenje) ali 48 ur pred izpostavljenostjo (profilaksa). V skupinah, ki so bile zdravljene, se je v primerjavi z modeli silikoze površina silikoznih vozličev zmanjšala na 84,28% in 67,93%, hidroksiprolina na 70,89% in 58,18%, kolagena tipa I na 71,08% in 58,13% ter kolagena tipa III na 80,13% in 70,70% (v ustreznih časovnih točkah). V preventivnih skupinah so se v primerjavi z 8-tedenskim modelom silikoze noduli zmanjšali na 61,13%, hidroksiprolin na 60,27%, kolagen tipa I in III pa na 40,13% in 65,77%. Skladno s tem sta barvanja HE in VG pokazala blažjo fibrozo. S tem se je zmanjšala vsebnost kolagena in vidne brazgotine [28].

Poleg tega ščiti pljuča in kosti, saj ob izpostavljenosti silicijevemu dioksidu umirja makrofagne poti. Pri podganah in na celičnih modelih je silicijev dioksid aktiviral TLR4 in RANKL, kar je povzročilo vnetje pljuč in resorpcijo kosti s strani osteoklastov. Nasprotno pa je zdravljenje z Ac-SDKP zaviralo signalizacijo TLR4 in RANKL, zaščitilo pljučni elastin, zmanjšalo pljučno vnetje in zmanjšalo aktivacijo makrofagov. Hkrati je Ac-SDKP v kosteh blokiral diferenciacijo osteoklastov ter pomagal ohranjati kostno gostoto in mikroarhitekturo. Ti rezultati kažejo na dvojno zaščito: bolj zdrava pljuča in stabilnejše kosti pri boleznih, povezanih s silicijevim dioksidom [29]. Prav tako zmanjšuje brazgotinjenje pljuč z zaviranjem zorenja celic, ki tvorijo brazgotine. TGF-β1 običajno spodbuja podporne celice pljuč (fibroblaste), da se preoblikujejo v miofibroblaste in proizvajajo dodaten kolagen. Ko smo Ac-SDKP dajali pred TGF-β1, so se ravni α-SMA in kolagena zmanjšale, zmanjšale pa so se tudi ravni TGF-β1 in njegovega receptorja. Nato je pri podganah s poškodbo pljuč, povzročeno s silicijevim dioksidom, dajanje Ac-SDKP pred ali po izpostavljenosti zmanjšalo ravni TGF-β1, signale RAS in aktivnost SRF ter zmanjšalo število α-SMA-pozitivnih miofibroblastov v pljučnih vozlih. Posledično se je zmanjšalo kopičenje kolagena, kar kaže na zaščito pred fibrozo [30, 31]. Poleg tega Ac-SDKP ščiti alveolarno sluznico, saj preprečuje, da bi se epitelijske celice preoblikovale v celice, ki tvorijo brazgotine. Pod vplivom signalov poškodb, kot sta silikoza in TGF-β1, se epitelijski označevalci (E-kaderin, SP-A) zmanjšajo, medtem ko se mezenhimski in fibrozni označevalci (vimentin, α-SMA, kolagen I/III) povečajo. Z Ac-SDKP se je ta škodljiva sprememba obrnila: ohranila se je epitelijska identiteta, zmanjšali so se označevalci fibroze, pot TGF-β1/ROCK1 pa je bila oslabljena. Posledično je občutljiva alveolarna površina ostala bližje normalni in manj nagnjena k brazgotinjenju [32]. Poleg tega ublaži stres "tovarne beljakovin" in celično smrt v alveolarnih celicah, kar posledično zmanjša brazgotinjenje pljuč. Ob silikozi celice kažejo visoke signale stresa ER (GRP78, fosforilirani PERK in eIF2α), CHOP in kaspazo-12, številne celice pa odmrejo. Z Ac-SDKP - kot tudi z blokatorjem stresa ER 4-PBA - so se ti stresni označevalci zmanjšali, celična smrt se je zmanjšala v celičnih testih in pri podganah, pljučni kolagen pa se je zmanjšal. Na splošno Ac-SDKP z umirjanjem poti PERK/eIF2α/CHOP in kaspaze-12 pomaga zaščititi plast epitelija in upočasni napredovanje fibroze [33].

Ac-SDKP za zdravje ledvic (na podlagi študij na živalih)

Ac-SDKP ščiti ledvice pri lupusu, ne da bi znižal krvni tlak. Nakagawa in drugi (2017) so pokazali, da pri miših NZBWF1, nagnjenih k lupusu, ohranja ledvične filtre (manj glomerulne skleroze) in zmanjšuje splošno poškodbo, ne da bi znižal sistolični krvni tlak. Pri Ac-SDKP so se huda hipertenzija, albumin v urinu in prezgodnja smrt pojavili pozneje, vendar te zamude niso bile statistično značilne [34]. Snov ščiti tudi delovanje ledvic med solnim stresom. Worou in drugi (2015) so preučevali na sol občutljive Dahlove podgane, ki so jih šest tednov zdravili z 800 ali 1600 µg/kg/dan. Krvni tlak se je zaradi slane prehrane še naprej zviševal, vendar je bilo v ledvicah manj vnetij, manj fibroze in bolj zdravi filtri. Le večji odmerek je zmanjšal raven albumina v urinu pri podganah, občutljivih na sol. Pri odpornejšem sevu (SS13BN) sta oba odmerka preprečila uhajanje albumina in strukturne poškodbe [35]. To kaže, da je bil zaščitni učinek neodvisen od krvnega tlaka. Peptid zmanjšuje tudi imunsko posredovano poškodbo ledvic pri lupusu. Liao in drugi (2015) so ugotovili, da so imele zdravljene miši, nagnjene k lupusu, po 20 tednih boljše delovanje ledvic, čeprav je bila raven avtoprotiteles proti lupusu nespremenjena. V ledvicah je bilo manj invazivnih imunskih celic, kot so makrofagi in celice T. Vnetni signali, kot so citokini in kemokini, so bili manjši, aktivacija proteinov komplementa (C5-9), RANTES, MCP-5 in ICAM-1 pa je bila zavirana. Posledično se je ohranila filtracijska funkcija in zmanjšale so se mikroskopske poškodbe [36].

V neki drugi študiji je kljub trajno visokemu krvnemu tlaku preprečil poškodbe ledvic, povezane s povišanim krvnim tlakom. Rhaleb in drugi (2011) so pokazali, da je Ac-SDKP (800 µg/kg/dan 12 tednov) pri miših, zdravljenih s fiziološko raztopino DOCA, zmanjšal brazgotinjenje ledvic (kolagen), širjenje filtracijskega matriksa in pritok monocitov/makrofagov, medtem ko je krvni tlak ostal povišan. Pomembno je, da se je normalizirala raven albumina v urinu - z 41 ± 5 µg na 13 ± 3 µg na 10 g telesne teže na dan, kar se je približalo kontrolni ravni - in delno se je obnovila izguba nefrina (ključnega proteina filtracijske vrzeli) [37]. Tako je Ac-SDKP zaščitil filtracijsko pregrado in zmanjšal brazgotinjenje ne glede na krvni tlak. Poleg tega ščiti pred brazgotinjenjem in disfunkcijo ledvic, ki jo povzroča sladkorna bolezen. Shibuya in drugi (2005) so pokazali, da je pri miših db/db s sladkorno boleznijo tipa 2 osemtedensko dajanje Ac-SDKP prek mini črpalk povzročilo približno trikratno povečanje plazemske koncentracije Ac-SDKP brez spremembe ravni sladkorja v krvi. Posledično so se preprečili glomerulni edem, prekomerna proliferacija mezangijskega matriksa in kopičenje zunajceličnega matriksa, raven kreatinina v plazmi pa se je približala normalni. Zmanjšala se je tudi albuminurija, čeprav zmanjšanje ni bilo statistično značilno. Mehanistično je blokiral vstop Smad3 v celično jedro in s tem zmanjšal signalizacijo TGF-β/Smad, povezano s fibrozo [38]. Poleg tega Ac-SDKP zmanjšuje brazgotinjenje ledvic pri sladkorni bolezni in predstavlja dodatno korist poleg zaviranja ACE. Castoldi in drugi (2013) so pri podganah povzročili sladkorno bolezen in nato dajali Ac-SDKP (1 mg/kg/dan), ramipril (3 mg/kg/dan), obe zdravili skupaj ali placebo. Pri nezdravljenih diabetičnih podganah so se najprej pojavile visoke vrednosti krvnega sladkorja, višje vrednosti albumina v urinu (albuminurija), ledvična fibroza

ledvično fibrozo in zmanjšano raven glomerulnega nefrina. Samo z Ac-SDKP se je ledvična fibroza zmanjšala, vendar se albuminurija ni izboljšala. Z ramiprilom sta se albuminurija in fibroza zmanjšali, raven nefrina pa se je obnovila. Pomembno je, da je kombinacija Ac-SDKP z ramiprilom zagotovila večje zmanjšanje fibroze kot ramipril sam, čeprav se albuminurija ni več izboljšala. Ac-SDKP zmanjšuje fibrozo pri diabetični nefropatiji in krepi antifibrozno zaščito zaviralcev ACE brez dodatne koristi za albuminurijo [39].

Zanimivo je, da so Zhang in drugi (2022) razvili biološko navdihnjen dvomrežni hidrogel, sestavljen iz želatine in kurkumin-cinka, prevlečen z DOPA in funkcionaliziran z imobiliziranim Ac-SDKP. Ta sistem je bil zasnovan za premagovanje omejitev prostih zdravil, vključno s slabo topnostjo, absorpcijo in stabilnostjo. Uporaba in vivo v delno nefrektomiranih ledvicah podgan je pokazala, da je hidrogel dosledno zmanjšal lokalno fibrozo, spodbujal angiogenezo in spodbudil nastanek novih ledvičnih kanalčkov. Testiranje materialov je potrdilo ustrezno poroznost, mehansko trdnost in biokompatibilnost, kar dodatno podpira njegov terapevtski potencial [40]. Primerjalne študije poudarjajo tudi različne in od stopnje odvisne učinke timozina-β4 (Tβ4). Zuo in drugi (2013) so uporabili modele enostranske obstrukcije sečevoda pri miših divjega tipa in miših, izključenih iz gena PAI-1, za oceno Ac-SDKP, Tβ4 in Tβ4 v kombinaciji z inhibitorjem prolil oligopeptidaze (POP). Ac-SDKP je dosledno zmanjšal fibrozo pri obeh genotipih, kar se je pokazalo z manjšim odlaganjem kolagena in fibronektina, manjšim številom aktiviranih miofibroblastov in makrofagov ter zmanjšano profibrozno signalizacijo [41]. Poleg tega so Wang in drugi (2010) pokazali, da Ac-SDKP zavira ledvično vnetje in fibrozo, povzročeno z obstrukcijo. Pri podganah z enostransko obstrukcijo sečnice je 14-dnevno zdravljenje zmanjšalo brazgotinjenje tubulointersticija in vnetne spremembe pri histološkem pregledu. Peptid je zmanjšal infiltracijo ledvičnih makrofagov (ED-1) ter znižal ravni beljakovin MCP-1, NF-κB, α-SMA in TGF-β1 v tubularnih in intersticijskih celicah. Zmanjšalo se je tudi izražanje genov MCP-1 in TGF-β1, kar kaže na to, da se je s tem zmanjšal tako prenos vnetja kot aktivacija zunajceličnega matriksa, ki sta ključna dejavnika ledvične fibroze [42]. Dodatni dokazi izhajajo iz modelov hipertenzije s kronično okvaro ledvic. Liao in drugi (2010) so podganam po 5/6 nefrektomiji dajali Ac-SDKP v odmerku 800 µg/kg/dan, in sicer pred poškodbo (preprečevanje) ali po poškodbi (odpravljanje). Kljub vztrajni hipertenziji in hipertrofiji levega prekata je zdravljenje v obeh skupinah zmanjšalo albuminurijo, zmanjšalo infiltracijo makrofagov in znižalo raven ledvičnega kolagena. Izguba nefrina v glomerulih se je tudi delno ohranila ali obnovila, kar kaže na izboljšano celovitost filtracijske pregrade. Te ugotovitve poudarjajo, da je peptid zagotavljal zaščito ledvic tako v zgodnjih kot v napredovalih fazah bolezni, predvsem s protivnetnimi in antifibroznimi učinki, ne pa z nadzorom krvnega tlaka [43].

Pri aldosteronsko-solni hipertenziji je peptid zmanjšal brazgotinjenje v srcu in ledvicah, ne da bi vplival na krvni tlak. Peng in drugi (2001) so preučevali podgane z odstranjeno eno ledvico, ki so jih

je šest tednov prejemal aldosteron in sol. To zdravljenje je zvišalo krvni tlak, povečalo srce in ledvice ter povečalo brazgotinsko tkivo (kolagen) in markerje celične rasti (PCNA). Dajanje Ac-SDKP, zlasti v večjem odmerku 800 µg/kg/dan, je znatno zmanjšalo kolagen in PCNA v odvisnosti od odmerka. Pomembno je, da sta krvni tlak in povečanje organov ostala nespremenjena, medtem ko je manjši odmerek (400 µg/kg/dan) zagotovil delno korist [44]. Pri imunsko pogojeni ledvični bolezni je peptid izboljšal delovanje ledvic in zmanjšal fibrozo. Omata in drugi (2006) so podgane z anti-GBM nefritisom, ki so jih začeli zdraviti 14 dni po začetku bolezni, štiri tedne zdravili z Ac-SDKP v odmerku 1 mg/kg/dan. V primerjavi z nezdravljenimi živalmi je zmanjšal raven beljakovin v urinu, znižal koncentracijo sečnine in kreatinina v plazmi ter izboljšal očistek kreatinina. Analiza tkiva je pokazala manj glomerulne skleroze in intersticijske fibroze. Mehanistično je zmanjšal raven fibronektina, kolagena in TGF-β1, zmanjšal signalizacijo Smad2, povečal Smad7 in zmanjšal kopičenje makrofagov v ledvičnem tkivu [45]. Pri sladkorni bolezni je peptid blokiral brazgotinjenje ledvic, saj je preprečil, da bi se celice krvnih žil preoblikovale v celice, ki tvorijo brazgotine. Nagai in drugi (2014) so pokazali, da je Ac-SDKP obnovil naravne zaščitne poti, vključno z let-7 mikroRNA in signalizacijo receptorjev FGF, ki jih je sladkorna bolezen zavirala. Posledično je zmanjšala fibrozo in prehod iz endotelija v mezenhim (EndMT). Pomembno je, da je njegova kombinacija z zaviralcem ACE še bolj izboljšala zaščito ledvic kot samo zaviranje ACE [46].

V drugi študiji je peptid obnovil zdravo presnovo ledvic in zmanjšal fibrozo. Srivastava in drugi (2020) so pri miših s sladkorno boleznijo primerjali zaviralce ACE, ARB, Ac-SDKP in njihove kombinacije. Blokirali so tudi njegovo naravno tvorbo z inhibitorjem prolinske oligopeptidaze (POPi). Rezultati so pokazali, da Ac-SDKP posreduje pri učinkih zaviralcev ACE s reprogramiranjem ledvične presnove: obnovil se je SIRT3, izboljšala se je mitohondrijska oksidacija maščobnih kislin in zmanjšala se je nenormalna izraba glukoze. Nasprotno pa so POPi zmanjšali naravne ravni, pospešili fibrozo in porušili presnovno ravnovesje. Pomembno je, da so zaviralci ACE (ne pa tudi ARB) delno obnovili njegove ravni in zmanjšali fibrozo. Tako zaviralci ACE kot Ac-SDKP so zmanjšali mezenhimsko remodelacijo ter znižali ravni kolagena I in fibronektina v diabetičnih ledvicah [47].

Pri zdravljenju raka je analog Ac-SDKP pomagal ohranjati krvne celice med kemoterapijo. Carde in drugi (1992) so seraspenid testirali v dvojno slepem, navzkrižnem preskušanju faze I-II, ki je vključevalo 53 bolnikov, ki so prejemali citarabin ali ifosfamid. V primerjavi s kontrolnimi obdobji so bolniki, ki so prejemali seraspenid, bolje zaščitili periferne krvne celice pred toksičnostjo kemoterapije. Zdravilo so dobro prenašali in ni imelo neželenih učinkov. Ti rezultati kažejo, da lahko peptidi, podobni Ac-SDKP, ščitijo kostni mozeg med citotoksičnim zdravljenjem [48]. V drugi študiji peptid ni zmanjšal toksičnosti za kri, vendar je bil varen. Cappelaere in drugi (1995) so preučevali 84 bolnikov z napredovalim ploščatoceličnim karcinomom, ki so prejemali karboplatin in kontinuiran odmerek 5-fluorouracila skupaj z

placebo ali goralatid (Ac-SDKP) v odmerku 12,5 ali 62,5 µg/kg/dan. V 221 ciklih kemoterapije med skupinami ni bilo razlik v najnižjem številu levkocitov, granulocitov, trombocitov ali hemoglobina v krvi. Tudi trajanje toksičnosti je ostalo nespremenjeno. Vendar sta bili anemija in limfopenija pogostejši pri goralatidu. Na splošno se je zdravilo dobro prenašalo, vendar pri teh odmerkih ni preprečilo izgube krvnih celic, povezane s kemoterapijo [49].

Pri sladkorni bolezni tipa 1 in tipa 2 je peptid izboljšal brazgotinjenje in delovanje ledvic. Nitta in drugi (2016) so miši CD-1 s streptozotocinom povzročeno sladkorno boleznijo tipa 1 in miši db/db s sladkorno boleznijo tipa 2 zdravili s peroralnim Ac-SDKP, imidaprilom (zaviralec ACE) ali obema zdraviloma skupaj. Peroralno zdravljenje, samostojno ali v kombinaciji, je zmanjšalo glomerulno sklerozo in tubulointersticijsko fibrozo. Plazemska raven cistatina C, ki je pri ledvični bolezni povišana, se je vrnila na normalno raven. Vse terapije so ponovno vzpostavile zaviranje antifibrotičnih mikroRNA (miR-29 in let-7), pri čemer je bilo največje izboljšanje opaženo v skupini, ki je prejemala kombinirano zdravljenje. Ravni peptidov v urinu so bile najvišje v skupini, ki je prejemala kombinirano zdravljenje, kar kaže na izboljšanje sistemske izpostavljenosti [50]. Pri imunsko pogojeni ledvični bolezni se je s tem zmanjšala raven proteinov v urinu ter zmanjšala vnetje in fibroza. Tan in drugi (2012) so mišim z lupusom 8 tednov dajali MRL/lpr 1,0 mg/kg/dan. V primerjavi z nezdravljenimi mišmi z lupusom so imele miši, ki so prejemale peptid, manjšo proteinurijo in boljše delovanje ledvic. V ledvičnem tkivu je bilo manj infiltrirajočih celic T in makrofagov. Mehanistično je prišlo do zmanjšanja aktivacije NF-κB in proizvodnje TNF-α ter zmanjšanja pro-fibrotičnih označevalcev (TGF-β1, α-SMA in fibronektina). Fosforilacija Smad2/3 je bila zavirana, Smad7 pa povečana. Pomembno je, da se odlaganje imunskih kompleksov in raven protiteles proti DSDNA nista spremenila, kar kaže na to, da so bile koristi bolj posledica zmanjšanja vnetja in fibroze kot pa spremembe v tvorbi protiteles [51].

Pri debelosti in visokem vnosu soli je zaščitil ledvice, saj je zmanjšal vnetje, fibrozo in celo krvni tlak. Maheshwari et al. (2018) so preučevali vitke (ZL) in debele (ZO) podgane Zucker, ki so jih 8 tednov hranili z običajno soljo (0,4%) ali visoko vsebnostjo soli (4%), pri čemer je podskupina ZO prejemala

1,6 mg/kg/dan. Visoka vsebnost soli je poslabšala ledvično vnetje in fibrozo v obeh skupinah, pri čemer je bila infiltracija makrofagov pri debelih podganah najhujša (87,8 ± 10,8 v primerjavi z 19,14 ± 1,5 celic/mm² pri vitkih podganah). Zdravljenje je zmanjšalo infiltracijo makrofagov pri debelih podganah na 32,18 ± 2,4 celic/mm² (P<0,05) in zmanjšalo glomerulno sklerozo ter intersticijsko fibrozo v skorji in meduli (P<0,05). Tudi sistolični krvni tlak pri debelih podganah, hranjenih s soljo, se je znižal s 164 ± 6,9 na 144,05

± 14,1 mmHg (P=0,004). Albuminurija je bila pri debelih podganah višja kot pri vitkih podganah, vendar se ni bistveno spremenila zaradi vnosa soli ali zdravljenja [52].

Ac-SDKP za zdravje možganov in živcev (na podlagi študij na živalih)

Zaščita na modelih Parkinsonove bolezni

Ta peptid pomaga zaščititi nevrone, ki proizvajajo dopamin, ter spodbuja boljše motorične sposobnosti in spomin pri modelih Parkinsonove bolezni. Kamarehei in Zahednasab (2025) sta v celičnih poskusih prva pokazala, da je predhodna obdelava živčnih celic SH-SY5Y z 20 nM tega peptida zaščitila celice pred 6-OHDA, toksinom, ki se pogosto uporablja za posnemanje Parkinsonove bolezni. V študijah na podganah so dnevni odmerki 800 µg/kg po poškodbi možganov s 6-OHDA ohranili več dopaminskih nevronov in zmanjšali celično smrt z zmanjšanjem aktivnosti kaspaze-3 in kaspaze-12. Zdravljene podgane so imele tudi boljšo motorično koordinacijo, boljši prostorski spomin ter manj simptomov tesnobe in depresije. Mehanistično so bile koristi posledica zmanjšanega oksidativnega stresa, ublažitve stresa endoplazemskega retikuluma (ER) in zmanjšanja vnetnih signalov v možganih, kar spodbuja preživetje in regeneracijo nevronov [53].

Regeneracija po poškodbi hrbtenjače

Pospešuje tudi okrevanje in preusmerja vnetje v zdravljenje po poškodbi hrbtenjače. Hashemizadeh in drugi (2022) so podganam Wistar dajali 0,8 mg/kg podkožno enkrat dnevno sedem dni, od dveh do šest ur po poškodbi hrbtenjače zaradi padca telesne teže. V primerjavi z nezdravljenimi živalmi so si zdravljene podgane povrnile boljšo sposobnost hoje, izgubile so manj motoričnih nevronov ter imele nižje ravni TNF-α (provnetni signal) in kaspaze-3. Hkrati se je povečala raven mRNA CD206, označevalca proaging M2 makrofagov. Pregledi tkiva so pokazali manjša območja poškodb. Na splošno je zdravljenje spremenilo imunski odziv iz škodljive aktivnosti tipa M1 v zaščitno aktivnost tipa M2, kar je imelo funkcionalne in strukturne koristi [54].

Zaščita po travmatski poškodbi možganov (TBI)

Ac-SDKP pomaga zaščititi možgane in pospešuje njihovo obnovo, če se daje kmalu po poškodbi. Zhang in drugi (2017) so pri podganah povzročili nadzorovane poškodbe skorje in jim to sredstvo (0,8 mg/kg/dan) dajali prek mini črpalke tri dni, od ene ure po poškodbi. Od 7. do 35. dne so se rezultati senzorično-motoričnih testov izboljšali, od 33. do 35. dne pa je bilo v primerjavi s kontrolno skupino boljše tudi prostorsko učenje (p < 0,05). Do konca študije sta se količina poškodb skorje in izguba hipokampalnih nevronov zmanjšala, medtem ko so bili rast krvnih žil, nastajanje novih nevronov in gostota dendritičnih bodic večji. Zgodnje zdravljenje je zmanjšalo tudi kopičenje fibrina in oslabilo aktivacijo imunskih celic. Mehanistični testi so pokazali, da blokada signalizacije TGF-β1/NF-κB pojasnjuje velik del protivnetnega učinka [55].

Prednosti pri bolezni, podobni multipli sklerozi (MS)

Prav tako zmanjšuje stres in vnetje v možganih pri modelih multiple skleroze. Pejman in drugi (2020) so miši C57BL/6 izpostavili eksperimentalnemu avtoimunskemu encefalomielitisu (EAE). Običajno EAE poveča markerje stresa ER (kaspaza-12, CHOP, PDI), oksidativni stres in pritok imunskih celic v hipokampus. Z zdravljenjem se je raven kaspaze-12 in CHOP v oligodendrocitih zmanjšala, aktivacija kaspaze-3 se je zmanjšala, oksidacija ROS in lipidna peroksidacija sta se zmanjšali, antioksidativna zmogljivost se je izboljšala, raven IL-6/IL-1β pa zmanjšala. Skeniranje možganov je potrdilo manjše poškodbe hipokampusa in manjšo infiltracijo imunskih celic, kar kaže na počasnejše napredovanje bolezni [56].

Ac-SDKP za zdravje jeter (na podlagi študij na živalih)

Upočasnitev brazgotinjenja jeter, ki ga povzročajo kemikalije

Peptid Ac-SDKP pomaga zaščititi jetra pred kemičnimi poškodbami z uravnavanjem ključnega stikala za nadzor genov in poti rasti. Wei et al. (2022) so preučevali podgane s poškodbami jeter, ki jih je povzročil ogljikov tetraklorid (CCl₄), in ugotovili manjše odmiranje stelatnih celic - glavnih celic, ki tvorijo brazgotine v jetrih. Zmanjšala se je tudi fibroza. Mehanistični testi so pokazali, da je zdravljenje zmanjšalo raven WTAP, encima, ki dodaja označevalce m⁶A v RNK. Ta sprememba je stabilizirala RNK Ptch1 in prilagodila aktivnost poti Hedgehog, ki je glavni dejavnik nastajanja brazgotin. Na splošno rezultati poudarjajo antifibrotični učinek prek poti WTAP/m⁶A/Ptch1, ki uravnava signalizacijo Hedgehog [59].

Zaščita pri fibrozi, ki jo povzročajo žolčevodi

Ac-SDKP ščiti jetra tudi pri brazgotinjenju, ki nastane zaradi zapore žolčnika. Zhang in drugi (2012) so pri podganah uporabili model zapora žolčnih vodov (BDL) in jih neprekinjeno zdravili štirinajst dni. V primerjavi z nezdravljenimi živalmi so pri tistih, ki so prejemale peptid, zavrli signalizacijo TGF-β1 in znižali raven označevalcev, povezanih z aktiviranimi stelatnimi celicami (α-SMA, FSP-1). Zmanjšalo se je tudi izražanje genov, povezanih s kolagenom (Col I, Col III), in encimov obnavljanja (MMP-2, TIMP-1, TIMP-2). Krvni označevalci, povezani z delovanjem jeter, so se izboljšali, saj so se ALT, AST, bilirubin in protrombinski čas približali normalnim vrednostim. Na tkivnih preparatih so opazili manjše število mastocitov, manjše kopičenje kolagena ter splošno zmanjšanje fibroze in vnetja [60].

Vzdrževanje naravne obrambe in signalov za popravilo

Pomaga jetrom ohraniti naravno odpornost med dolgotrajnimi kemičnimi poškodbami. Chen in drugi (2010) so ugotovili, da se pri stalni izpostavljenosti CCl₄ naravne ravni peptida sčasoma zmanjšajo. Nadomeščanje z infuzijo (800 µg/kg/dan osem tednov) je ohranjalo izhodiščne ravni ter zmanjšalo poškodbe jeter, vnetje in fibrozo. Ravni jetrnih encimov v krvi so se zmanjšale, število vnetnih celic CD45⁺ se je zmanjšalo.

, zmanjšale pa so se zaloge kolagena in α-SMA. Pro-fibrotični signali, kot sta TGF-β1 in fosfo-Smad2/3, so se zmanjšali, medtem ko so se signali, povezani s popravilom, BMP-7 in fosfo-Smad1/5/8, povečali. V celičnih testih je neposredno blokiral aktivacijo stelatnih celic, kar potrjuje antifibrotični učinek na celični ravni [61].

Ac-SDKP za obnovo kože in tkiv (na podlagi študij na živalih) H3. Hidrogelno lepilo za kožo za pospešitev celjenja in zmanjšanje brazgotinjenja

Za prenašanje in sproščanje Ac-SDKP je bilo razvito posebno lepilo za kožo na osnovi celuloze (Dopa-OCMC-PAA, v primerjavi z OCMC-PAA). Obe različici sta pokazali dobre profile nabrekanja in razgradnje, visoko mehansko trdnost in varnost za uporabo s celicami, vendar se je Dopa-OCMC-PAA najbolje obnesel. Pri miših s krvavitvijo iz jeter je to lepilo hitreje ustavilo krvavitev. V testih na fibroblastih je povečalo raven encimov, odgovornih za preoblikovanje tkiva (MMP-1 in MMP-3), hkrati pa zmanjšalo aktivnost kolagenskih genov. Pri kuncih z odebeljenimi brazgotinami na ušesu je lepilo Dopa-OCMC-PAA v kombinaciji s peptidom zmanjšalo oceno brazgotin, zmanjšalo število celic, izboljšalo strukturo kolagena in ponovno pokazalo višje ravni MMP-1/MMP-3 ob nižji aktivnosti kolagenskih genov. Skratka, ti rezultati so pokazali boljše celjenje ran in manjše brazgotinjenje [62].

Lokalna uporaba izboljša preživetje in obnovo kože

Pri operacijah kožnih loput pri podganah (trebušnih in hrbtnih) so injekcije Ac-SDKP v odmerku 5 µg/kg dvakrat na dan tri dni povečale preživetje zdrave kože. Površina živega lopatice se je povečala s 50,9 ± 19,3% na 66,4 ± 7,5% za ventralne lopatice in s 53,4 ± 4,2% na 74,7 ± 6,6% za dorzalne lopatice. Za kožno tkivo, poškodovano z UVB, je lokalna uporaba izboljšala preživetje. Lokalna uporaba je pospešila tudi rast nove kože, povečala raven keratina-14 (označevalec celic, ki gradijo kožo) in povečala raven fibronektina, kar dokazuje njegovo vlogo pri razvoju in obnovi krvnih žil [63].

Zaščita tvorbe krvi med kemoterapijo

Pri miših, ki so prejemale kemoterapevtsko zdravilo doksorubicin, je dajanje Ac-SDKP v odmerku 2,4 µg/dan (neprekinjeno ali deljeno), ki se je začelo 48 ur pred zdravljenjem, zmanjšalo smrtnost in zaščitilo matične celice, odgovorne za tvorbo krvi (LTRC, CFU-S, HPP-CFC in CFU-GM). Dodajanje G-CSF je dodatno pospešilo obnovo CFU-GM. Čas dajanja je bil ključnega pomena - za zaščito pred kratkoročno poškodbo kostnega mozga in dolgoročno izgubo matičnih celic je bilo treba dajanje začeti pred kemoterapijo [64].

Močnejši antifibrozni učinek zaradi izboljšanih analogov in kombinacije zaviralcev ACE

V poskusih s pljučnimi fibroblasti je oblika Ac-SDKP, odporna na ACE, zmanjšala signale brazgotinjenja (TGF-β/Smad3) in kopičenje kolagena bolje kot naravna oblika. Skrajšani fragment (Ac-DKP) je imel le šibek učinek in ga je ACE počasi razgradil. V kombinaciji z zaviralci ACE je peptid bolj zaviral hidroksiprolin (označevalec kolagena) kot sam, kar kaže na močnejši učinek in klinični potencial. V odmerkih od 10-⁶ do 10-¹⁷ M sta tako timozin-β4 (Tβ4) kot peptid zmanjšala rast mastocitov (najbolje pri 10-¹⁴ M) in povzročila nenavadne jedrne spremembe, povezane z zastojem celičnega cikla. Pri koncentraciji 10-⁸ M sta povzročila tudi sproščanje kemikalij iz mastocitov (degranulacijo), pri čemer je imel peptid močnejši učinek (~89%) kot Tβ4 (~57%). Drugi fragmenti Tβ4 niso pokazali nobenega učinka, kar dokazuje, da je bil učinek specifičen za intaktni Tβ4 in peptid [65, 66].

Odmerek Ac-SDKP

V predkliničnih študijah se Ac-SDKP najpogosteje daje podkožno prek mini črpalke v odmerku približno 0,8 mg/kg/dan za zmanjšanje fibroze in vnetja v srcu/vaskulaturi in ledvicah. V študijah na miših po miokardnem infarktu se včasih uporablja odmerek 1,6 mg/kg/dan, da se zagotovi zgodnja zaščita. Pri možganih/nevronih se običajno uporablja odmerek približno 0,8 mg/kg/dan za 3-7 dni v kratkih ciklih, ki se začnejo v nekaj urah po poškodbi. V celičnih študijah je običajno, da se pred zdravljenjem uporabi odmerek približno 10 nM. V jetrih se v protokolih proti fibrozi med kronično poškodbo pogosto uporablja odmerek približno 0,8 mg/kg/dan. Pri modelu z bleomicinom v pljučih se je uporabljal odmerek 0,6 mg/kg intraperitonealno s ponavljajočimi se odmerki z začetkom na dan 0 ali dan 7. Pri obnovi kože/rane je lokalno odmerjanje vključevalo 5 µg/kg na injekcijo dvakrat na dan tri dni ali hidrogele, ki vsebujejo peptide za lokalno sproščanje. V hematologiji/obnovi kostnega mozga se uporabljajo zelo majhni mikrogramski odmerki, kot je 2,4 µg/dan pri miših pred kemoterapijo, in kratki odmerki µg/kg/dan v zgodnjih kliničnih preskušanjih.

Izjava o omejitvi odgovornosti

Ta članek je bil napisan v izobraževalne namene in je namenjen ozaveščanju o obravnavani snovi. Pomembno je opozoriti, da članek govori o snovi na splošno - ni opis določenega izdelka (kemijskega reagenta). Ne predlagamo uporabe kemičnih reagentov na ljudeh - to je zakonsko prepovedano, saj mora biti izdelek za uporabo za zdravljenje registriran kot zdravilo. Informacije v besedilu temeljijo na razpoložljivih znanstvenih študijah in niso namenjene kot zdravniški nasvet ali spodbujanje samozdravljenja. Bralec se mora pri vseh odločitvah o zdravju in zdravljenju posvetovati z usposobljenim zdravstvenim delavcem.

Reference

1. Wang, W., Jia, W. in Zhang, C. (2022). Vloga osi Tβ4-POP-Ac-SDKP pri fibrozi organov. International journal of molecular sciences, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D'Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P. in Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP zmanjšuje umrljivost in tveganje za raztrganino srca po akutnem miokardnem infarktu. PLoS Ena, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/ journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N. in Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP obrne fibrozo srca pri podganah z ledvično-žilno hipertenzijo. Hipertenzija, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP obrne vnetje in fibrozo pri podganah s srčnim popuščanjem po miokardnem infarktu. Hipertenzija, 43(2), 229-236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock,

D. R. in Rhaleb, N. E. (2004). Antifibrozni učinki Ac-SDKP in zaviranja angiotenzinske konvertaze pri hipertenziji. Časopis za hipertenzijo, 22(3), 593-603. https://doi.org/ 10.1097/00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/

6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C. in Carretero, O. A. (2001). Učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na sintezo DNK in kolagena v srčnih fibroblastih podgan. Hipertenzija, 37 (3), 827-832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D'Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J. in Carretero, O. A. (2009). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin preprečuje remodelacijo in disfunkcijo srca, ki ju povzroča galektin-3, lektin, ki uravnava adhezijo/rast pri sesalcih. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404-H412. https://doi.org/ 10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E. in Carretero, O. A. (2001). Dolgoročni učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na odlaganje kolagena v levem prekatu pri podganah s hipertenzijo, povzročeno s poškodbo dveh ledvic in zaporo ene od njih. Cirkulacija, 103(25), 3136-3141. https://doi.org/ 10.1161/01.cir.103.25.3136 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/
9. Cavasin M. A. (2006). Terapevtski potencial timozina beta4 in njegovega derivata N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina (Ac-SDKP) pri zdravljenju srca po miokardnem infarktu. American journal of cardiovascular drugs : drugs, devices, and other interventions, 6(5), 305-311. https://doi.org/ 10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P. in Carretero, O. A. (2013). N-acetil-Ser-Asp-Lys-Pro zavira aktivacijo matriks metaloproteinaze z interlevkinom-1β v srčnih fibroblastih. Pflügers Archiv - European Journal of

Fiziologija, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/

11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E. in Carretero, O. A. (2012). Zdravljenje z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom prepreči eksperimentalni avtoimunski miokarditis pri podganah. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114-H1127. https:// doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P. in Carretero, O. A. (2014). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin zmanjša zamreženje srčnega kolagena in vnetje pri hipertenzivnih podganah, ki jih je povzročil angiotenzin II. Klinična znanost, 126(1), 85-

13. Peng, H., Xu, J., Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E. in Rhaleb, N. E. (2019). Zdravljenje z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom ščiti srce pred prekomernimi poškodbami miokarda in srčnim popuščanjem pri miših. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 97(8), 753-765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G. in Stella, A. (2009). Preprečevanje fibroze miokarda z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom pri diabetičnih podganah. Klinična znanost, 118(3), 211-220. https:// doi.org/10.1042/cs20090234 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D. in Pokharel, S. (2018). Učinki novega peptida Ac-SDKP na s sevanjem povzročeno poškodbo koronarnega endotelija in pretok krvi v miokardu v mirovanju. Kardio-onkologija, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1  https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K. in Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP zmanjšuje proizvodnjo kolagena, spodbujeno s stresom ER, v srčnih fibroblastih z zaviranjem izražanja NF-κB, ki ga posreduje CHOP. Frontiers in Pharmacology, 15, 1352222. https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L. in Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP zavira izražanje ICAM-1, ki ga povzroči TNF-α, v endotelijskih celicah z zaviranjem kinaze IκB in aktivacije NF-κB. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176-H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D'Ambrosio, M. A. in Carretero, O. A. (2008). Preprečevanje fibroze aorte z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom pri hipertenziji, povzročeni z angiotenzinom II. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253-H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H. in Pokharel, S. (2018). Majhen peptid Ac-SDKP zavira

kardiomiopatija, povzročena z obsevanjem. Circulation: srčno popuščanje, 11(8), e004867. https://doi.org/ 10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/

20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S. in Vancheri, C. (2015). Učinki timozina β4 in njegovega N-terminalnega fragmenta Ac-SDKP na človeške pljučne fibroblaste, obdelane s TGF-β, in na mišjem modelu pljučne fibroze, povzročene z bleomicinom. Strokovno mnenje o biološki terapiji, 15(Suppl 1), S211-S221. https://doi.org/ 10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y.,

Xu, H., Li, S. in Yang, F. (2023). Ac-SDKP spodbuja zaviranje β-katenina, ki ga posreduje KIF3A, prek ciliarnega mehanizma, da bi omejil epitelijsko-miofibroblastično transformacijo, povzročeno s silicijevim dioksidom. Biomedicina in farmakoterapija, 166, 115411. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/

22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E. in Athari, S. S. (2022). Imunomodulatorni učinki N-acetil-seril-aspartil-prolina in vazoaktivnega intestinalnega peptida na patofiziologijo kronične obstruktivne pljučne bolezni. Temeljna in klinična farmakologija, 36(6), 1005-1010. https:// doi.org/10.1111/fcp.12811 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F. in Xu, H. (2020). Sinteza in identifikacija novega prolinskega peptida Ac-SDK (biotin), ki lahko pri podganah s silikozo povzroči antifibrozne učinke. Oblikovanje, razvoj in zdravljenje zdravil, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). Preventivni in terapevtski učinki N-terminalnega fragmenta timozina β4 Ac-SDKP v modelu pljučne fibroze, povzročene z bleomicinom. Oncotarget, 7(23), 33841-33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y. in Deng, H. J. (2022). Regulativni učinek Ac-SDKP na pot fosforiliranega proteina toplotnega šoka 27/SNAI1 pri podganah s silikozo. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90-96. https://doi.org/10.3760/ cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y. in Deng, H. J. (2023). Metaanaliza zaviranja pljučne fibroze z Ac-SDKP na živalskih modelih. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Na naslov Zhi, 41 (4), 262-270. https://doi.org/10.3760/  cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D. in Wu, K.-F. (2009). [Antifibrozni učinek N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina prek uravnavanja izražanja transformacijskega rastnega faktorja beta in rastnega faktorja vezivnega tkiva pri podganah s silikozo]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390-394. PMID: 20039536 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/

28.Yan, J.-B., Zhang, L.-J. in Li, Q. (2008). [Antifibrotični učinek N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina v pljučih podgan s silikozo]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401-405. PMID: 19080377 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/

• Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W.,

Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F. in Xu, H. (2021). Ac-SDKP ublaži aktivacijo pljučnih makrofagov in kostnih osteoklastov pri podganah, izpostavljenih silicijevemu dioksidu, z zaviranjem signalnih poti TLR4 in RANKL. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/ JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/

30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D. in Wang, R. (2012). Nova antifibrotična tarča Ac-SDKP: zaviranje diferenciacije miofibroblastov v pljučih podgan s silikozo. PLoS Ena, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D. in Yang, F. (2016). Acetilirani α-tubulin, ki ga uravnava N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin (Ac-SDKP), deluje antifibrotično pri pljučni fibrozi podgan, povzročeni s silicijevim dioksidom. Znanstvena poročila, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D. in Yang, F. (2016). Zaščitni učinki Ac-SDKP na folikularne epitelijske celice prek inhibicije EMT po poti TGF-β1/ROCK1 pri silikozi pri podganah. Toksikologija in uporabna farmakologija, 294, 1-10. https://doi.org/10.1016/ j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X. in Yang, F. (2018). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin (Ac-SDKP) blaži silikotično fibrozo z zaviranjem apoptoze alveolarnih epitelijskih celic tipa II prek posredovanja stresa endoplazemskega retikuluma. Toksikologija in uporabna farmakologija, 350, 1-10. https://doi.org/10.1016/ j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L. in Carretero, O. A. (2017). Učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na krvni tlak, ledvično okvaro in umrljivost pri sistemskem eritematoznem lupusu. Fiziološka poročila, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D'Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E. in Carretero, O. A. (2015). Zaščitni učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na ledvice pri podganah, občutljivih na Dahlovo sol. Hipertenzija, 66(4), 816-822. https://doi.org/10.1161/ HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D'Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P. in Carretero, O. A. (2015). N-acetil- seril- lizilaprolin: mehanizmi zaščite ledvic pri mišjem modelu sistemskega eritematoznega lupusa. American Journal of Fiziologija - Fiziologija ledvic, 308 (10), F1146-F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/

37.Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. in Carretero, O. A. (2011). Zaščitni učinki N-acetil-Ser-Asp-Lys-Pro na ledvice pri hipertenzivnih miših, ki jih povzroča deoksikortikosteron acetat s soljo. Časopis za hipertenzijo, 29(2), 330-338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/

• Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M. in Koya, D. (2005). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin preprečuje ledvično odpoved in proliferacijo mezangijskega matriksa pri miših s sladkorno boleznijo db/db. Sladkorna bolezen, 54(3), 838-845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
• Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G. in Stella, A. (2013). Antifibrotični učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na ledvice pri diabetičnih podganah. American Journal of Nephrology, 37(1), 65-73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
• Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L. in Hu, B. (2022). Biomimetični hidrogel z dvojno mrežo blaži ledvično fibrozo in spodbuja regeneracijo ledvic. Journal of Kemija materialov B, 10 (45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
• Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A. in Fogo, A. B. (2013). Timozin β4 in njegov razgradni produkt, Ac-SDKP, sta nova dejavnika za popravljanje pri ledvični fibrozi. Kidney International, 84(6), 1166-1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
• Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S. in Xie, R. (2010). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin omili ledvično vnetje in tubulointersticijsko fibrozo pri podganah. International Journal of Molecular Medicina, 26 (6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
• Liao, T.-D., Yang, X.-P., D'Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E. in Carretero, O. A. (2010). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin ublaži ledvične poškodbe in disfunkcijo pri hipertenzivnih podganah z zmanjšano ledvično maso: Svet za raziskave hipertenzije. Hipertenzija, 55(2), 459-467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 20026760/
• Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A. in Rhaleb, N. E. (2001). Antifibrozni učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na srce in ledvice pri hipertenzivnih podganah, povzročenih z aldosteronom in soljo. Hipertenzija, 37(2 Pt 2), 794-800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
• Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M. in Inomata, N. (2006). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin omili napredovanje ledvične disfunkcije in fibroze pri podganah WKY z ugotovljenim glomerulonefritisom. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674-685. https://doi.org/10.1681/ ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
• Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K. in Koya, D. (2014). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin zavira s sladkorno boleznijo povezano

s sladkorno boleznijo povezano ledvično fibrozo in endotelijsko-mezenhimskim prehodom. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/

47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K. in Koya, D. (2020). Metabolično reprogramiranje z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom ščiti pred diabetično ledvično boleznijo. British Journal farmakologije, 177 (16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M. in drugi (1992). [Seraspenid (acetilSDKP): Klinična raziskava faze I-II hematopoetskega inhibitorja, ki ščiti pred toksičnostjo monokemoterapije z araciklinom in ifosfamidom]. Klinična študija C R Acad Sci III, 315(13), 545-550. PMID: 1300237 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Randomizirana placebo študija zaščite kostnega mozga z goralatidom pri bolnikih s ploščatoceličnim karcinomom zgornjih dihal in prebavil ali požiralnika, zdravljenih s kombinacijo karboplatina in fluorouracila]. Bull Cancer, 82(9), 732-737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K. in Koya, D. (2016). Peroralno dajanje N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina s terapevtskim režimom izboljša ledvično bolezen pri miših s sladkorno boleznijo tipa 1 in tipa 2. BioMed Research Mednarodno, 2016 , 9172157 . https://doi.org/10.1155/2016/9172157  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X. in Yang, N. (2012). Ac-SDKP omili napredovanje lupusnega nefritisa pri miših MRL/lpr. Mednarodna imunofarmakologija, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L. in Carretero,

O. A. (2018). Zaščitni učinki N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina (Ac-SDKP) na ledvice pri debelih podganah na dieti z visoko vsebnostjo soli. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/ 10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/

53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Nevroprotektivni učinki peptida Ac-SDKP v celicah SH-SY5Y in modelu Parkinsonove bolezni pri podganah pred oksidativnim stresom in stresom ER, ki ga povzroča 6-OHDA. Nevropeptidi, 112, 102534. https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M. in Hadjighassem, M. (2022). Peptid Ac-SDKP izboljša funkcionalno okrevanje po poškodbi hrbtenjače v predkliničnem modelu. Nevropeptidi, 92, 102228. https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A. in Xiong, Y. (2017). Zdravljenje travmatske poškodbe možganov pri podganah z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom. Journal of

Nevrokirurgija, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699  http:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/

56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S. in Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP omili napredovanje eksperimentalnega avtoimunskega encefalomielitisa z zaviranjem ER in oksidativnega stresa v hipokampusu miši C57BL/6. Brain Research Bulletin, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E. in Zhang, Z. G. (2014). Kombinirano zdravljenje z N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolinom in tkivnim aktivatorjem plazminogena zagotavlja močno nevroprotekcijo pri podganah po možganski kapi. Udar, 45(4), 1108-1114. https:// doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S. in Ryu, J.

H. (2015). Fragment peptida timozina β4 pospešuje nevrogenezo v hipokampusu in olajša prostorski spomin. Nevroznanost, 310, 51-62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/

59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B. in Liu, Z. (2022). N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin (AcSDKP) preko osi WTAP/m6A/Ptch1 po poti Hedgehog omili fibrozo jeter. Gen, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y. in Zhang, Y. (2012). Antifibrozni učinek N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina na fibrozo jeter, povzročeno z žolčno ligacijo pri podganah. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283-5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B.,

Fan, J. G. in Li, D. G. (2010). Ohranjanje osnovnih ravni AcSDKP ublaži fibrozo jeter pri podganah, ki jo povzroča ogljikov tetraklorid. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/ j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/

62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A. in Brouki Milan, P. (2025). Lepilni hidrogel na osnovi celuloze, ki vsebuje peptid N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin za pospešitev celjenja ran in preprečevanje brazgotinjenja v modelu brazgotine na zajčjem ušesu in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 322(Pt 1), 144981. https:// doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovačević, M., Bignon, J. in Wdzieczak-Bakala, J. (2006). Acetil-serin-asparaginil-lizin-prolin tetrapeptid izboljša preživetje kožnih lopatic in pospeši celjenje ran. Popravilo rane in . Regeneracija, 14 (3), 306-312. https://doi.org/10.1111/  j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F. in Carde,

P. (1998). Tetrapeptid acetil-N-Ser-Asp-Lys-Pro (goralatid) ščiti pred toksičnostjo, ki jo povzroča doksorubicin: izboljšano preživetje miši in zaščita matičnih in progenitornih celic kostnega mozga. Kri, 91(2), 441-449. PMID: 9427696 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/

65.Ramasamy, V., Ntsekhe, M. in Sturrock, E. (2021). Raziskovanje antifibroznega potenciala peptidov z zaporedjem N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolin. Klinična in eksperimentalna farmakologija in fiziologija, 48(11), 1558-1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/

• Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E. in Huff, T. F. (2004). Timozin beta

4 in njegov N-terminalni tetrapeptid AcSDKP zavirata proliferacijo ter povzročata displastična, neapoptotična jedra in degranulacijo mastocitov. Kemija in biotska raznovrstnost, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/