Ac-SDKP elinten suojelussa ja korjauksessa: näyttöä sydämestä, munuaisista, maksasta, hermostosta ja ihosta.

Kirjallisuuteen perustuva kuvaus tymosiini-beta-fragmentin 4 (1-4) (Ac-SDKP) mahdollisista vaikutuksista. (Tämä ei ole tuotekuvaus, vastuuvapauslauseke sivun alareunassa.)

Ac-SDKP (N-asetyyliseryyli-aspartyyli-lysyl-proliini) on hyvin pieni proteiinifragmentti, joka on peräisin toisesta luonnollisesta proteiinista nimeltä tymosiini β4. Kehossa erityiset entsyymit leikkaavat tymosiini β4:n pienemmiksi paloiksi, ja yksi tämän prosessin tuloksista on Ac-SDKP [1]. Tämä pieni molekyyli on tärkeä, koska se auttaa suojaamaan elimiä arpeutumiselta (fibroosilta), joka syntyy, kun liikaa jäykkää kudosta kertyy vamman tai sairauden jälkeen. Ongelmana on, että Ac-SDKP ei säily elimistössä kovin pitkään.

- hajoaa nopeasti ACE-entsyymin (angiotensiinikonvertaasientsyymi) avulla. Mielenkiintoista on, että ACE:tä estävät lääkkeet (kuten jotkin verenpainelääkkeet) voivat nostaa Ac-SDKP:n pitoisuuksia jopa viisinkertaisiksi, mikä lisää sen suojaavaa vaikutusta [1].

Aluksi tutkijat ajattelivat, että Ac-SDKP:n tärkein tehtävä oli estää veren kantasoluja kasvamasta liian nopeasti. Viimeaikaiset tutkimukset osoittavat kuitenkin, että sen suurempi rooli on kudosten paranemisessa ja suojaamisessa. Se auttaa pysäyttämään arpikudoksen liiallisen lisääntymisen elimissä, kuten sydämessä, keuhkoissa, maksassa ja munuaisissa. Se esimerkiksi vähentää tiettyjen signaalien aktiivisuutta, jotka saavat solut tuottamaan liikaa kollageenia (arpien pääproteiini), ja estää korjaussoluja (fibroblasteja) muuttumasta arpia muodostaviksi soluiksi. Munuaissairauksien tapauksessa Ac-SDKP on todella lupaava. Se ei ainoastaan auta munuaisia toimimaan paremmin, vaan se myös vähentää arpia estämällä liian monen immuunisolun pääsyn ja lievittämällä haitallisia prosesseja, jotka yleensä pahentavat vaurioita. Lyhyesti sanottuna Ac-

SDKP toimii elimistön luonnollisena "arpeutumista ehkäisevänä" ja "kudoksia suojaavana" molekyylinä. Se edistää paranemista, vähentää tulehdusta ja voi olla hyödyllinen sellaisten sairauksien hoidossa, joissa arpeutumisella ja kudosvaurioilla on tärkeä rooli.

Ac-SDKP suojaa sydäntä (eläinkokeiden perusteella).

Useissa tieteellisissä tutkimuksissa on kuvattu Ac-SDKP:n potentiaalia sydämen terveydelle sekä hätä- että pitkäaikaisongelmissa. Hiiren sydäninfarktimallissa Nakagawa et al. antoivat Ac-SDKP:tä annoksella 1,6 mg/kg/vrk pienen ihonalaisen pumpun kautta ja havaitsivat selviä hyötyjä: sydämen seinämän repeämät (sydämen repeämät) vähenivät 51,0%:stä 27,3%:hen ja kuolleisuus laski 56,9%:stä 31,8%:hen. Peptidi näytti toimivan rauhoittamalla "ensimmäisenä auttajana" toimivia immuunisoluja, jotka voivat pahentaa vaurioita (M1-makrofagit), mutta ei muuttamalla auttavia korjaavia makrofageja (M2) tai neutrofiilejä. Se myös hidasti sydänkudosta infarktin jälkeen hajottavan entsyymin (MMP-9) toimintaa, kun taas toinen merkkiaine (MPO) pysyi muuttumattomana, mikä viittaa kohdennettuun, tarkoitukselliseen toimintaan [2]. Peng ym. osoittivat, että pitkäaikaisen korkean verenpaineen aiheuttaman sydämen arpeutumisen tapauksessa Ac-SDKP saattoi vähentää olemassa olevaa arpikudosta, ei vain estää sitä. Rotilla, joilla oli vakiintunut verenpainemalli, Ac-SDKP:n päivittäinen anto annoksella 400-800 µg/kg (ihon alle) 8 viikon ajan vähensi kollageenin määrää sydämessä - joka on arpeutumisen tärkein merkki - annosriippuvaisesti (suurempi annos oli tehokkaampi). Verenpaine sinänsä ei laskenut, eikä angiotensiini I:n ja bradykiniinin normaali vaste vaikuttanut, joten hyöty ei johtunut pelkästään verenpaineen alenemisesta. Ac-SDKP:n pitoisuudet veressä nousivat 2-5-kertaisiksi, ja keskeiset "arpia aiheuttavat" signaalit sydämessä (TGF-β ja CTGF) vähenivät, mikä vahvistaa suoran arpia ehkäisevän vaikutuksen [3].

Sydäninfarktin jälkeen jatkuva turvotus ja arpeutuminen voivat johtaa sydämen vajaatoimintaan. Yang ym. testasivat Ac-SDKP:tä sekä varhaisessa vaiheessa (vaurioiden estämiseksi) että myöhemmin (vaurioiden korjaamiseksi). Molemmissa tapauksissa sydämen kollageenin kokonaispitoisuus väheni (esimerkiksi ~24 µg/mg:sta ~15 µg/mg:iin ennaltaehkäisevässä ryhmässä ja ~23 µg/mg:sta ~23 µg/mg:iin ennaltaehkäisevässä ryhmässä).

~14 µg/mg käänteisryhmässä). Myös immuunisolujen haitallinen kertyminen väheni: makrofagit vähenivät noin kolmanneksella kussakin ryhmässä, ja TGF-β-positiiviset solut vähenivät samanaikaisesti. Nämä hyödyt saavutettiin alentamatta verenpainetta tai pienentämättä sydämen kokoa, eikä pumppausvoima parantunut selvästi profylaksiryhmässä. Arpeutumisen ja tulehduksen tasainen väheneminen viittaa kuitenkin sydämen rakenteen paranemiseen ajan myötä [4].

Ac-SDKP voi myös selittää osan ACE:tä estävien lääkkeiden aiheuttamista "ylimääräisistä" kudoseduista. Rasoul ym. vertasivat angiotensiini II:n aiheuttaman verenpainetaudin mallia ryhmiin, jotka saivat kaptopriilia tai Ac-SDKP:tä (400-800 µg/kg/vrk). Tämä nosti veritasoja moninkertaisesti ja toisti monet ACE:n estäjien kaltaiset suojaavat ominaisuudet: vähemmän solujen hypertrofiaa sydämessä, vähemmän makrofageja ja syöttösoluja, alhaisemmat TGF-β- ja CTGF-tasot ja vähemmän kollageenin kertymistä. Tärkeää on, että nämä hyödyt ilmenivät ilman, että verenpaine laski tai sydämen paksuuntuminen väheni, mikä viittaa

suora suojaava vaikutus sydänkudokseen [5]. Ac-SDKP hidastaa arpien muodostumista sydämessä solutasolla. Rhaleb et al. testasivat laboratoriossa rottien sydämen tukisoluissa (fibroblasteissa) hyvin pieniä annoksia Ac-SDKP:tä (0,05-100 nmol/l) ja havaitsivat kaksi keskeistä vaikutusta: solujen kasvun (DNA:n kopioinnin) väheneminen normaaliksi noin 1 nmol/l:n kohdalla ja kollageenin (tärkein "arpiproteiini") väheneminen vasteena endoteliini-1:lle, joka on voimakas arpia muodostava signaali. Pienemmät annokset vaikuttivat parhaiten kollageeniin; hyvin suuret annokset olivat vähemmän tehokkaita. Peptidi näytti vaimentavan yleistä solun signaalikytkintä (p44/42 MAPK/ERK), ja tunnettu MAPK:n salpaaja saavutti saman hyödyn. Yksinkertaisesti sanottuna Ac-SDKP käskee fibroblasteja hidastamaan sekä proliferaatiota että liiallista arpien muodostumista, oletettavasti vähentämällä keskeisen kasvureitin aktiivisuutta [6].

Lisäksi se suojaa sydäntä galektiini-3:n aiheuttamilta vaurioilta. Aikuisilla rotilla tehdyssä tutkimuksessa Liu et al. antoivat galektiini-3:a (proteiini, joka aiheuttaa tulehdusta ja arpeutumista) neljän viikon ajan ja havaitsivat enemmän tulehdussoluja, paksummat sydänseinämät, vakavampaa arpeutumista verisuonten ympärillä ja solujen välillä, korkeampia TGF-β/Smad3-signalointipitoisuuksia (reitti, joka edistää arpeutumista) ja heikompaa pumppausta kaikukardiografiassa. Ac-SDKP:n (800 µg/kg/vrk) lisääminen esti useimmat näistä muutoksista: tulehdussolut, arpeutuminen ja sydämen seinämän paksuuntuminen vähenivät ja sydämen toiminta parani. Tiedot viittaavat siihen, että se suojaa sydäntä kytkemällä pois päältä TGF-β/Smad3-"arpikytkimen" ja lievittämällä tulehdusta [7]. Lisäksi se vähentää sydämen arpeutumista pitkäaikaisessa verenpainetaudissa muuttamatta itse verenpainetta. Käyttämällä klassista verisuonimallia (2 munuaista, 1 puristin) rotilla Rhaleb et al. antoivat Ac-SDKP:tä (400 µg/kg/vrk, ihon alle). Vaikka verenpaine ja sydämen hypertrofia pysyivät koholla, peptidihoito vähensi merkittävästi sekä tulehdus- että proliferoivia soluja sydänlihaksessa. Tärkeää on, että se normalisoi interstitiaalisen kollageenifraktiota vähentämällä sitä hypertensiivisten rottien noin 10,1%:stä noin 5,4%:hen, mikä on lähes sama taso kuin kontrollieläimillä (≈5,3%). Lyhyesti sanottuna se vähensi haitallisia kudosvaurioita, vaikka painekuormitus pysyi muuttumattomana, mikä viittaa suoraan rooliin kudosten paranemisessa [8]. Lisäksi yhdessä tymosiini-β4:n kanssa Ac-SDKP edistää kudoksen korjaantumista sydäninfarktin jälkeen. Kertomuksellisessa katsauksessa Cavasin et al. totesivat, että tymosiini-β4 edistää sekä solujen migraatiota että selviytymistä. Sen johdannainen, Ac-SDKP, tarjoaa lisähyötyjä toimimalla fibroottisen aineen vastaisena aineena hypertensiossa. Sydäninfarktin malleissa Ac-SDKP:n osoitettiin kumoavan arpien muodostumisen ja vähentävän tulehdusta. Se myös edisti angiogeneesiä, kuten osoitettiin sekä in vivo että ex vivo -tutkimuksissa. Lisäksi Ac-SDKP vähensi sydämen seinämän repeämisriskiä hiirillä, mikä korostaa sen terapeuttista potentiaalia sydän- ja verisuonitautien korjaamisessa. Hyötyjen välillä on paljon päällekkäisyyttä, mikä viittaa siihen, että Ac-SDKP kantaa osan tymosiini β4:n terapeuttisesta vaikutuksesta. Tutkija mainitsi kuitenkin, että näiden laboratoriotulosten ja eläinkokeiden vahvistamiseksi tarvitaan vielä ihmistutkimuksia [9].

Lisäksi Ac-SDKP vähentää IL-1β:n käynnistämien kudosta hajottavien entsyymien aktiivisuutta. Aikuisten rottien sydämen fibroblasteissa Rhaleb et al. osoittivat, että interleukiini-1β (IL-1β), pro-inflammatorinen sytokiini,

lisäsi merkittävästi matriksin metalloproteinaasien (MMP-2, MMP-9 ja MMP-13) ilmentymistä. Nämä entsyymit hajottavat solunulkoisen matriisin komponentteja ja vaikuttavat haitalliseen uudelleenmuodostukseen. Ac-SDKP ei muuttanut MMP:iden perusekspressiota. Se kuitenkin esti voimakkaasti IL-1β:n aiheuttamaa näiden entsyymien määrän nousua. Samaan aikaan Ac-SDKP lisäsi metalloproteinaasien kudosinhibiittoreiden (TIMP-1 ja TIMP-2), MMP:n aktiivisuuden luonnollisten estäjien, ilmentymistä. Tämä auttoi tasapainottamaan matriisin vaihtuvuutta. Ac-SDKP vähensi myös kahden tärkeimmän tulehdusta ja proliferaatiota edistävän signaalireitin aktivoitumista: NF-κB ja ERK/MAPK. Mielenkiintoista on, että IL-1β-stimulaatio ei lisännyt kollageenin tuotantoa tässä mallissa. Ac-SDKP:llä ei myöskään ollut vaikutusta kollageenisynteesiin. Tämä viittaa siihen, että sen suojaava vaikutus johtuu pikemminkin kudoksen uudelleenmuodostuksen valikoivasta tasapainottamisesta kuin yleisestä kollageenituotannon muutoksesta. Yhdessä nämä tulokset osoittavat, että Ac-SDKP voi suojata sydänlihasta patologiselta uudelleenmuodostumiselta tasapainottamalla matriisin säätelyä uudelleen [10].

Ac-SDKP suojaa autoimmuunin aiheuttamilta sydänvaurioilta rotilla. T-solujen aiheuttaman sydänlihastulehduksen mallissa Nakagawa ym. hoitivat immunisoituja Lewisrotteja Ac-SDKP:llä ja havaitsivat sydämen toiminnan säilyvän sekä systolisena että diastolisena. Hoito vähensi myös sydämen laajentumista, vähensi arpien muodostumista ja säilytti terveemmän sydänlihaksen rakenteen. Histologinen analyysi osoitti, että soluttautuvien immuunisolujen, kuten makrofagien, dendriittisolujen ja T-lymfosyyttien määrä oli pienempi. Samanaikaisesti tärkeimpien tulehduksen välittäjäaineiden, kuten sytokiinien (IL-1α, TNF-α, IL-2, IL-17), kemokiinien (CINC-1, IP-10), adheesiomolekyylien (ICAM-1, L-selektiini) ja matriksin metalloproteinaasien pitoisuudet pienenivät merkittävästi. Mielenkiintoista on, että Ac-SDKP ei muuttanut myosiinispesifisten autovasta-aineiden tai antigeenispesifisten T-soluvasteiden tasoja. Tämä osoittaa, että sen kardioprotektiivinen vaikutus johtuu ensisijaisesti immuunisolujen rekrytoinnin vähenemisestä ja tulehdusvälittäjäaineiden estämisestä eikä niinkään muutoksesta autovasta-aineiden tuotannossa tai T-solujen aktivaatiossa [11].

Ac-SDKP vähentää tulehdusta ja kollageenin ristisidosten muodostumista angiotensiini II:n aiheuttamassa verenpaineessa. González et al. antoivat rotille angiotensiini II:ta kolmen viikon ajan, ja erillistä ryhmää hoidettiin Ac-SDKP:llä. Verenpaine ja sydämen hypertrofia pysyivät koholla molemmissa ryhmissä, mutta Ac-SDKP esti sekä kollageenin kokonaismäärän että ristisilloittuneen kollageenin lisääntymisen. Tämä suojavaikutus johtui lysyylioksidaasi (LOX) mRNA:n ja LOXL1-proteiinin, kollageenin ristisilloittumisesta ja arpien jäykistymisestä vastaavien entsyymien, estämisestä. Lisäksi Ac-SDKP vähensi TGF-β:n ilmentymistä, esti NF-κB:n aktivaatiota ja vähensi CD4⁺- ja CD8⁺-T-lymfosyyttien ja CD68⁺-makrofagien infiltraatiota sydänkudokseen. Tärkeää on, että CD4⁺ T-solujen sisäänvirtaus korreloi LOXL1:n ilmentymisen kanssa, mikä viittaa mekanistiseen yhteyteen immuunisolujen aktiivisuuden ja fibroosin välillä. Nämä havainnot korostavat, että Ac-SDKP:llä on voimakkaita anti-fibroottisia ja anti-inflammatorisia vaikutuksia riippumatta sen vaikutuksista verenpaineeseen [12].

Lisäksi se suojaa sydäntä sydäninfarktin jälkeen hiirillä varhais- ja myöhäisvaiheessa. Peng ym. antoivat Ac-SDKP:tä (1,6 mg/kg/vrk) C57BL/6J-hiirille sydäninfarktin jälkeen. Ensimmäisellä viikolla hoito vähensi tappavien seinämäruptuurien määrää, laski ICAM-1-tasoja, vähensi makrofagien sisäänvirtausta ja gelatiinin sulatusaktiivisuutta, esti p53:n toimintaa ja vähensi sydänlihaksen solukuolemaa; samaan aikaan pienten verisuonten määrä vamman reunalla lisääntyi, mikä viittaa uusien verisuonten parempaan kasvuun. Viidennellä viikolla sydämissä oli vähemmän interstitiaalista kollageenia, rakenne säilyi, endoplasmisen retikulumin stressin (CHOP) tasot olivat alhaisemmat ja SERCA2 (kalsium-aineenvaihdunnan kannalta ratkaiseva) säilyi ennallaan, ja sydämen toiminta oli yleisesti ottaen parempi. Lyhyesti sanottuna se vähentää varhaisia vaurioita ja edistää terveempää pitkän aikavälin remodellia [13].

Toisessa tutkimuksessa Ac-SDKP vähentää sydämen arpeutumista ja parantaa diabeettisen kardiomyopatian diastolista toimintaa. Castoldi ym. aiheuttivat rotille diabeteksen ja aloittivat kaksi kuukautta myöhemmin Ac-SDKP:n (1 mg/kg/vrk minipumppujen avulla) kahdeksan viikon ajan. Diabetesta sairastaville rotille kehittyi korkeat sokeriarvot, merkittävää interstitiaalista ja perivaskulaarista fibroosia sekä korkeammat TGF-β1- ja fosfo-Smad2/3-tasot sydämessä. Ac-SDKP vähensi molempia fibroosia ja vähensi TGF-β/Smad-signalointia myös ACE:n estäjää ramipriiliä saavilla eläimillä. Sydämen ultraäänitutkimus osoitti, että diabetes heikensi systolea ja diastolea; insuliini ja ramipriili palauttivat molemmat toiminnot, kun taas Ac-SDKP paransi osittain diastolea (diastolista toimintaa). Nämä tiedot korostavat antifibroottista hyötyä, joka liittyy kohtalaiseen toimintakyvyn paranemiseen tässä mallissa [14]. Lisäksi se suojaa sepelvaltimoita säteilyvaurioilta ja säilyttää verenkierron. Rintakehän säteilytyksen saaneessa rotan mallissa Sharma et al. antoivat Ac-SDKP:tä ihon alle 18 viikon ajan. Säteily vähensi lepovirtausta, tappoi endoteelisoluja, lisäsi sepelvaltimoiden fibroosia ja häiritsi tiukkoja liitosproteiineja (Claudin-1, JAM-2). Tämä palautti verenkierron normaaliksi, säilytti endoteelisolut, vähensi fibroosia ja palautti tiukat liitokset. Laboratoriotutkimukset osoittivat, että Ac-SDKP tunkeutuu endoteelisoluihin ja vähentää säteilyn aiheuttamia reaktiivisten happilajien pitoisuuksia; elävissä eläimissä leimattu peptidi konsentroitui endoteelisoluihin muutamassa tunnissa. Nämä tulokset viittaavat verisuonten suojaamiseen, vähäisempiin oksidatiivisiin vaurioihin ja parempaan mikroverisuonten eheyteen säteilytyksen jälkeen [15]. Lisäksi se vähentää stressin aiheuttamaa arpien muodostumista sydämen tukisoluissa. Ihmisen sydämen fibroblasteissa soluja esikäsiteltiin Ac-SDKP:llä (10 nM) ja sen jälkeen niitä käsiteltiin tunikamysiinillä (0,25 µg/ml), joka aiheuttaa "proteiinistressiä" solutehtaan (endoplasmisen retikulumin) sisällä. Ac-SDKP auttoi pysäyttämään stressaantuneet solut tuottamasta liikaa kollageenia. Se toimi rauhoittamalla solujen stressireaktiota, vähentämällä CHOP-nimisen stressiproteiinin aktiivisuutta ja vähentämällä NF-κB-nimisen tulehduskytkimen aktiivisuutta. Se alensi myös IL-6:n, tulehdusta laukaisevan signaalin, määrää. Kun CHOP:tä vähennettiin geneettisesti, se vähensi edelleen NF-κB:n ja tyypin I kollageenin aktiivisuutta sekä proteiini- että mRNA-tasolla, mikä vahvistaa saman reitin [16]. Yksinkertaisesti sanottuna: stressitilanteessa tämä auttaa soluja välttämään liiallista arpiproteiinien tuotantoa.

Lisäksi se vähentää TNF-α:n aiheuttamaa verisuonten limakalvon tulehdusta. Ihmisen sepelvaltimon endoteelisoluissa TNF-α-stimulaatio aiheutti ICAM-1:n ilmentymisen merkittävän lisääntymisen. Tällä adheesiomolekyylillä on keskeinen rooli leukosyyttien tarttumisen edistämisessä verisuonen pintaan. Esikäsittely Ac-SDKP:llä vähensi ICAM-1-tasoja merkittävästi annosriippuvaisesti. Mekanistinen analyysi osoitti, että tämä vaikutus välittyi IKK → IκB → NF-κB -signaalikaskadin estämisestä, joka on ratkaisevan tärkeä tulehdusgeenien ilmentymisen aktivoitumisen kannalta. Mielenkiintoista on, että kaksi muuta signaalireittiä, p38 MAPK ja ERK, eivät muuttuneet, mikä osoittaa, että Ac-SDKP on valikoivasti vuorovaikutuksessa NF-κB-reitin kanssa ja vaikuttaa tulehdusta ehkäisevästi endoteelisoluissa [17]. Ac-SDKP auttaa pitämään verisuonten limakalvon rauhallisena ja vähentää sen "tahmeutta" tulehduksen aikana. Lisäksi se ehkäisee suurten valtimoiden arpeutumista angiotensiini II:n aiheuttamassa hypertensiossa, vaikka se ei alentaisi itse painetta. Angiotensiini II:lla hoidetuilla rotilla Ac-SDKP vähensi kollageenin kertymistä aorttaan ja vähensi arpeutumista aiheuttavia signaaleja (tyypin I ja III kollageenin mRNA). Se vähensi myös proteiinikinaasi C:n yliaktiivisuutta, oksidatiivista stressiä, ICAM-1:tä ja makrofagien pääsyä verisuonen seinämään. Fibroosisignaalit vähenivät (vähemmän TGF-β1- ja Smad2-aktiivisuutta), kun taas tämän reitin luonnollinen estäjä (Smad7) lisääntyi. Verenpaine ja aortan paksuus pysyivät korkeina, joten nämä verisuonen seinämään kohdistuvat hyödyt johtuivat pikemminkin suorista kudosvaikutuksista kuin paineen muutoksista [18].

Ac-SDKP suojaa sydäntä myös säteilyvaurioilta. Rotilla, jotka saivat kohdennettua rintakehän säteilyä, 18 viikon Ac-SDKP-annos säilytti sydämen toiminnan, vähensi solunulkoisen matriksin kertymistä ja fibroosia, vähensi makrofagien sisäänvirtausta ja vähensi sydämen solukuolemaa. Myös fibroosista vastaavan makrofagiproteiinin Mac-2:n (galektiini-3) määrä ja vapautuminen vähenivät. Ac-SDKP:tä havaittiin makrofagien sisällä lähellä solun ydintä ja se esti säteilyn käynnistämän Mac-2:n vapautumisen; kun fibroblasteista puuttui Mac-2, säteily aiheutti paljon heikompia arpeutumissignaaleja [19]. Se auttaa ylläpitämään terveempää verisuonistoa ja sydänkudosta säteilytyksen jälkeen vähentämällä tulehdusta ja arpien muodostumista.

Ac-SDKP keuhkojen terveydelle (eläinkokeiden perusteella).

Ac-SDKP:llä oli voimakkaampia antifibroottisia vaikutuksia kuin tymosiini-β4:llä keuhkomalleissa. Ensinnäkin laboratoriotutkimuksissa, joissa käytettiin idiopaattista keuhkofibroosia (IPF) sairastavien ihmisten keuhkosoluja, se hidasti solujen liiallista kasvua ja vähensi kahta TGF-β:n aiheuttamaa fibroosisignaalia: α-SMA:ta ja kollageenia. Hiirillä, joille annettiin bleomysiiniä keuhkovaurion aikaansaamiseksi, tymosiini-β4 auttoi varhaisessa vaiheessa (7. päivä) vähentämällä tulehdusta ja varhaista arpeutumista, mutta ei pysäyttänyt fibroosia myöhemmissä vaiheissa (14.-21. päivä). Nämä havainnot viittaavat siihen, että Ac-SDKP estää arpeutumisen alkuvaiheita soluissa ja saattaa tarjota vakaampia ja pitkäaikaisempia fibroosinestohyötyjä kuin sen esiaste, tymosiini-β4 [20]. Lisäksi se estää piidioksidiin liittyvää keuhkojen arpeutumista palauttamalla KIF3A:n ja sammuttamalla β-kateniinisignalointia.

. Erityisesti silikoosissa KIF3A:n pitoisuudet olivat alhaiset potilasnäytteissä ja rottien keuhkoissa. Kun KIF3A palautettiin, β-kateniinin ja sen alempana olevien MRTF-A:n ja SRF:n aktiivisuus väheni, mikä hidasti arpeutumiseen liittyvää epiteelin ja myofibroblastien välistä siirtymää (EMyT). Tämä lisäsi johdonmukaisesti KIF3A:n toimintaa ja vähensi näin ollen β-kateniini/MRTF-A/SRF-signalointia. Kun KIF3A kuitenkin eliminoitiin, Ac-SDKP menetti nämä hyödyt, mikä vahvistaa, että KIF3A on välttämätön sen antifibroottisen vaikutuksen kannalta [21].

Toisessa tutkimuksessa Ac-SDKP yhdessä VIP:n kanssa lievitti hiirillä tupakanpolton aiheuttamia keuhkoahtaumatautiin liittyviä muutoksia. Se vähensi oksidatiivisia vaurioita (alhaisemmat MDA-pitoisuudet), arpeutumista (alhaisemmat hydroksiproliinipitoisuudet) ja fibroosin keskeistä aiheuttajaa (alhaisemmat TGF-β-pitoisuudet). Samaan aikaan tulehdussytokiinit (TNF-α, IL-1β, IL-6) vähenivät ja antioksidanttisuoja parani (suurempi SOD-aktiivisuus). Vastaavasti keuhkokudoksessa mikroskoopilla näkyi vähemmän tulehdusta ja vähemmän rakenteellista uudelleenmuodostumista. Näiden aineiden yhdistelmällä saavutettiin antioksidanttisia, anti-inflammatorisia ja anti-fibroottisia hyötyjä savuvamman mallissa [22, 23]. Ac-SDKP osoitti myös merkittäviä tuloksia sekä bleomysiinin aiheuttaman keuhkofibroosin ehkäisyssä että hoidossa. CD-1-hiirillä Ac-SDKP:tä (0,6 mg/kg, i.p.) annettiin päivästä 0 alkaen CD-1-hiirille. tai Päivä 7 paransi eloonjäämistä ja vähensi bleomysiiniin liittyvää laihtumista. Lisäksi keuhkoissa esiintyi vähemmän turvotusta ja vähemmän invasiivisia immuunisoluja, terveempi kudosrakenne ja vähemmän fibroosia: sekä kollageenivärjäytyminen että liukoisen kollageenin pitoisuudet vähenivät. Mekanistisesti pro-fibroottiset IL-17- ja TGF-β-signaalit vähenivät ja α-SMA väheni, mikä viittaa myofibroblastien vähenemiseen. Tärkeää on, että hyötyjä ilmeni sekä varhaisessa (ennaltaehkäisevässä) että myöhäisessä (terapeuttisessa) aikataulussa [24]. Lisäksi se vähentää silikoosin aiheuttamaa keuhkofibroosia P-HSP27/SNAI1-reitin kautta. Rotilla silikoosi aiheutti P-HSP27:n, SNAI1:n, α-SMA:n ja kollageeni I/III:n lisääntymistä keuhkokudoksessa. Sitä vastoin Ac-SDKP - jota annettiin joko ennen altistumista tai taudin puhkeamisen jälkeen - vähensi kaikkia näitä merkkiaineita ja vähensi sekä P-HSP27:n että α-SMA:n suhteen positiivisten solujen määrää kuvantamisessa. Tärkeää on, että sen antaminen terveille kontrolleille ei muuttanut proteiinien ilmentymistä, mikä viittaa siihen, että sen vaikutus on valikoiva sairaisiin keuhkoihin [25].

Lisäksi se on osoittanut voimakkaita antifibroottisia vaikutuksia useissa eläinkokeissa. Meta-analyysissä, johon sisältyi 18 satunnaistettua tutkimusta (428 eläintä, 2008-2021), havaittiin, että Ac-SDKP vähensi useita fibroosin signaaleja verrattuna käsittelemättömiin malleihin: α-SMA (SMD -2,44), tyypin I kollageeni (SMD -5,36), tyypin III kollageeni (SMD -3,07), TGF-β (SMD -2,88) ja keuhkokyhmyjen ala (SMD

-1,80); kaikki P<0,001. Lisäksi hydroksiproliini, kollageenin kemiallinen mittari, muuttui myös merkittävästi [SMD 7,62; 95% CI 4,90-10,33; P=0,000], mikä on johdonmukaista kollageenin liikevaihtoon kohdistuvan vaikutuksen kanssa. Nämä tulokset osoittavat, että Ac-SDKP hidastaa johdonmukaisesti fibroosia keuhkosairauksien malleissa [26]. Toisessa tutkimuksessa se vähensi TGF-β- ja CTGF-tasoja ja esti silika-assosioituneen keuhkojen arpeutumisen rotilla. Rotat saivat piidioksidia fibroosin aikaansaamiseksi, minkä jälkeen niille annettiin ennaltaehkäisevää tai terapeuttista Ac-SDKP:tä (800 µg/kg/vrk). Silikoosin kontrolliryhmään verrattuna TGF-β1- (~0,244 ± 0,016) ja CTGF (~0,241 ± 0,017) -proteiinipitoisuudet pienenivät merkittävästi hoidetuissa keuhkoissa. Vastaavasti mRNA-tasot

väheni ja CTGF mRNA oli huomattavasti pienempi verrattuna malliryhmiin (P<0,05). Profylaksiaryhmässä sekä TGF-β1:n proteiini- että mRNA-tasot olivat merkittävästi alhaisemmat kuin 8 viikon silikoosimallissa (P<0,05). Lopuksi keuhkojen histologia vahvisti vähemmän fibroosia [27]. Lisäksi se estää kollageenin kertymistä ja parantaa keuhkojen rakennetta silikoosissa. Silikoosille altistuneet rotat saivat Ac-SDKP:tä joko vamman jälkeen (hoito) tai 48 tuntia ennen altistumista (ennaltaehkäisy). Hoitoryhmissä silikoosimalleihin verrattuna silikoosin kyhmyjen pinta-ala pieneni 84,28%:iin ja 67,93%:iin, hydroksiproliini 70,89%:iin ja 58,18%:iin, tyypin I kollageeni 71,08%:iin ja 58,13%:iin ja tyypin III kollageeni 80,13%:iin ja 70,70%:iin (vastaavina ajankohtina). Ennaltaehkäisevissä ryhmissä verrattuna 8 viikon silikoosimalliin kyhmyt vähenivät 61,13%:iin, hydroksiproliini 60,27%:iin ja tyypin I ja III kollageeni 40,13%:iin ja 65,77%:iin. Vastaavasti HE- ja VG-värjäykset osoittivat lievempää fibroosia. Tämä vähensi sekä kollageenipitoisuutta että näkyvää arpeutumista [28].

Lisäksi se suojaa keuhkoja ja luita rauhoittamalla makrofagien kulkureittejä, kun ne altistuvat piidioksidille. Rotilla ja solumalleissa piidioksidi aktivoi TLR4:ää ja RANKL:ää aiheuttaen keuhkotulehduksen ja osteoklastien luun resorptiota. Sitä vastoin Ac-SDKP-hoito esti TLR4- ja RANKL-signalointia, suojasi keuhkojen elastiinia, vähensi keuhkotulehdusta ja vähensi makrofagien aktivoitumista. Samaan aikaan luussa Ac-SDKP esti osteoklastien erilaistumista ja auttoi ylläpitämään luun tiheyttä ja mikroarkkitehtuuria. Nämä tulokset viittaavat kaksoissuojaan: terveempiin keuhkoihin ja vakaampiin luihin piidioksidiin liittyvissä sairauksissa [29]. Se vähentää myös keuhkojen arpeutumista estämällä arpia muodostavien solujen kypsymistä. TGF-β1 stimuloi normaalisti keuhkojen tukisoluja (fibroblasteja) muuttumaan myofibroblasteiksi ja tuottamaan lisää kollageenia. Kun Ac-SDKP:tä annettiin ennen TGF-β1:tä, α-SMA:n ja kollageenin pitoisuudet laskivat ja TGF-β1:n ja sen reseptorin pitoisuudet laskivat myös. Myöhemmin rotilla, joilla oli piidioksidin aiheuttama keuhkovaurio, Ac-SDKP:n antaminen ennen tai jälkeen altistumisen vähensi TGF-β1-tasoja, RAS-signaaleja ja SRF-aktiivisuutta sekä vähensi α-SMA-positiivisten myofibroblastien määrää keuhkokyhmyissä. Tämän seurauksena kollageenin kertyminen väheni, mikä osoittaa suojaa fibroosia vastaan [30, 31]. Lisäksi Ac-SDKP suojaa keuhkorakkuloiden limakalvoa estämällä epiteelisoluja muuttumasta arpia muodostaviksi soluiksi. Vauriosignaalien, kuten silikoosin ja TGF-β1:n, vaikutuksesta epiteelin merkkiaineet (E-kadheriini, SP-A) vähenevät, kun taas mesenkyymi- ja fibroosimerkkiaineet (vimentiini, α-SMA, kollageeni I/III) lisääntyvät. Ac-SDKP:llä tämä haitallinen muutos kääntyi päinvastaiseksi: epiteeli-identiteetti säilyi, fibroosimerkkiaineet vähenivät ja TGF-β1/ROCK1-reitti vaimeni. Näin ollen herkkä alveolipinta pysyi lähempänä normaalia ja vähemmän alttiina arpeutumiselle [32]. Lisäksi se lievittää "proteiinitehtaan" stressiä ja solukuolemaa alveolisoluissa, mikä puolestaan vähentää keuhkojen arpeutumista. Kun silikoosi iskee, soluissa näkyy runsaasti ER-stressisignaaleja (GRP78, fosforyloitunut PERK ja eIF2α), CHOP ja kaspaasi-12, ja monet solut kuolevat. Ac-SDKP:n - samoin kuin ER-stressin estäjän 4-PBA:n - vaikutuksesta nämä stressimerkit vähenivät, solukuolema väheni solutesteissä ja rotilla, ja keuhkojen kollageeni väheni. Kaiken kaikkiaan rauhoittamalla PERK/eIF2α/CHOP-reittiä ja kaspaasi-12:ta Ac-SDKP auttaa suojaamaan epiteelikerrosta ja hidastaa fibroosin etenemistä [33].

Ac-SDKP munuaisten terveydelle (eläinkokeiden perusteella).

Ac-SDKP suojaa munuaisia lupuksessa alentamatta verenpainetta. Nakagawa ym. (2017) osoittivat, että lupusalttiilla NZBWF1-hiirillä se säilytti munuaissuodattimet (vähemmän glomeruluskleroosia) ja vähensi kokonaisvaurioita alentamatta systolista verenpainetta. Vaikean verenpaineen, virtsan albumiinipitoisuuden ja ennenaikaisen kuoleman ilmaantuminen tapahtui Ac-SDKP:llä myöhemmin, mutta nämä viiveet eivät olleet tilastollisesti merkitseviä [34]. Aine suojaa myös munuaisten toimintaa suolastressin aikana. Worou ym. (2015) tutkivat suolaherkkiä Dahl-rotteja, joita hoidettiin 800 tai 1600 µg/kg/vrk kuuden viikon ajan. Verenpaine nousi edelleen suolaruokavalion seurauksena, mutta munuaisissa ilmeni vähemmän tulehdusta, vähemmän fibroosia ja terveempiä suodattimia. Ainoastaan suurempi annos vähensi virtsan albumiinipitoisuutta suola-herkillä rotilla. Resistentimmällä kannalla (SS13BN) molemmat annokset estivät albumiinivuodon ja rakenteelliset vauriot [35]. Tämä osoittaa, että suojavaikutus oli riippumaton verenpaineesta. Peptidi vähentää myös immuunivälitteisiä munuaisvaurioita lupuksessa. Liao ym. (2015) havaitsivat, että 20 viikon kohdalla hoidetuilla lupusalttiilla hiirillä oli parempi munuaisten toiminta, vaikka lupuksen autovasta-ainepitoisuudet olivat muuttumattomia. Munuaisissa oli vähemmän invasiivisia immuunisoluja, kuten makrofageja ja T-soluja. Tulehdussignaalit, kuten sytokiinit ja kemokiinit, olivat vähäisempiä, ja komplementtiproteiinien (C5-9), RANTES:n, MCP-5:n ja ICAM-1:n aktivoituminen estyi. Tämän seurauksena suodatustoiminta säilyi ja mikroskooppiset vauriot vähenivät [36].

Toisessa tutkimuksessa se ehkäisee verenpainetautiin liittyviä munuaisvaurioita huolimatta jatkuvasti korkeasta verenpaineesta. Rhaleb ym. (2011) osoittivat, että DOCA-suolaliuosta saaneilla hiirillä Ac-SDKP (800 µg/kg/vrk 12 viikon ajan) vähensi munuaisten arpeutumista (kollageeni), suodatusmatriisin laajenemista ja monosyyttien/makrofagien sisäänvirtausta, kun taas verenpaine pysyi koholla. Tärkeää on, että virtsan albumiinipitoisuus normalisoitui - 41 ± 5 µg:sta 13 ± 3 µg:aan 10 g:n ruumiinpainoa kohti päivässä, mikä lähestyy kontrollitasoa - ja nefriinin (keskeinen suodatusrakoproteiini) häviäminen palautui osittain [37]. Näin ollen Ac-SDKP suojasi suodatusesteen ja vähensi arpeutumista verenpaineesta riippumatta. Lisäksi se suojaa arpeutumiselta ja diabeteksen aiheuttamalta munuaisten toimintahäiriöltä. Shibuya ym. (2005) osoittivat, että tyypin 2 diabetesta sairastavilla db/db-hiirillä kahdeksan viikkoa kestänyt Ac-SDKP:n anto minipumppujen kautta johti plasman Ac-SDKP-pitoisuuden noin kolminkertaistumiseen ilman, että verensokeriarvot muuttuivat. Tämän seurauksena glomerulaarinen ödeema, liiallinen mesangiaalisen matriisin proliferaatio ja solunulkoisen matriisin kertyminen estyivät, ja plasman kreatiniinitasot lähestyivät normaalia tasoa. Albuminuria väheni myös, vaikka väheneminen ei ollut tilastollisesti merkitsevää. Mekanistisesti se esti Smad3:n pääsyn solun tumaan, mikä vähensi fibroosiin liittyvää TGF-β/Smad-signalointia [38]. Lisäksi Ac-SDKP vähentää munuaisten arpeutumista diabeteksessa ja on lisähyöty ACE:n eston ohella. Castoldi ym. (2013) aiheuttivat rotille diabeteksen ja antoivat sitten Ac-SDKP:tä (1 mg/kg/vrk), ramipriiliä (3 mg/kg/vrk), molempia lääkkeitä yhdessä tai lumelääkettä. Ensin hoitamattomille diabeetikoille kehittyi korkeat verensokeriarvot, korkeammat virtsan albumiinipitoisuudet (albuminuria), munuaisfibroosi

munuaisfibroosi ja glomerulaarisen nefriinin määrän väheneminen. Pelkällä Ac-SDKP:llä munuaisfibroosi väheni, mutta albuminuria ei parantunut. Ramipriilillä sekä albuminuria että fibroosi vähenivät ja nefriinitasot palautuivat. On tärkeää, että Ac-SDKP:n ja ramipriilin yhdistelmä vähensi fibroosia enemmän kuin pelkkä ramipriili, vaikka albuminuria ei parantunut entisestään. Ac-SDKP vähentää diabeettisen nefropatian fibroosia ja tehostaa ACE:n estäjien fibroottista suojaa ilman lisähyötyä albuminuriaan [39].

Mielenkiintoista on, että Zhang et al. (2022) kehittivät bioinspiroituneen kaksoisverkkohydrogeelin, joka koostui gelatiinista ja kurkumiinisinkistä, päällystettiin DOPA:lla ja funktionalisoitiin immobilisoidulla Ac-SDKP:llä. Tämä järjestelmä suunniteltiin voittamaan vapaiden lääkkeiden rajoitukset, kuten huono liukoisuus, imeytyminen ja stabiilisuus. In vivo -sovellus osittain nefrektomoitujen rottien munuaisissa osoitti, että hydrogeeli vähensi johdonmukaisesti paikallista fibroosia, edisti angiogeneesiä ja stimuloi uusien munuaistiehyiden muodostumista. Materiaalitestit vahvistivat riittävän huokoisuuden, mekaanisen lujuuden ja bioyhteensopivuuden, mikä tukee entisestään sen terapeuttista potentiaalia [40]. Vertailevat tutkimukset korostavat myös tymosiini-β4:n (Tβ4) erillisiä ja vaiheesta riippuvia vaikutuksia. Zuo ja muut (2013) käyttivät villityypin ja PAI-1-geenin poissulkevien hiirten yksipuolisen virtsanjohtimen tukkeutumisen malleja arvioidakseen Ac-SDKP:tä, Tβ4:ää ja Tβ4:ää yhdessä prolyylioligopeptidaasin (POP) estäjän kanssa. Ac-SDKP vähensi johdonmukaisesti fibroosia molemmissa genotyypeissä, mikä näkyi vähäisempänä kollageenin ja fibronektiinin laskeutumisena, vähäisempänä aktivoituneiden myofibroblastien ja makrofagien määränä sekä vähentyneenä pro-fibroottisena signalointina [41]. Lisäksi Wang ym. (2010) osoittivat, että Ac-SDKP esti munuaistulehdusta ja obstruktion aiheuttamaa fibroosia. Rotilla, joilla oli yksipuolinen virtsanjohtimen tukos, 14 päivän hoito vähensi tubulointerstitiaalista arpeutumista ja tulehduksellisia muutoksia histologisessa tutkimuksessa. Peptidi vähensi munuaisten makrofagien infiltraatiota (ED-1) ja vähensi MCP-1-, NF-κB-, α-SMA- ja TGF-β1-proteiinitasoja tubulaarisissa ja interstitiaalisissa soluissa. Myös MCP-1:n ja TGF-β1:n geeniekspressio väheni, mikä viittaa siihen, että se vähensi sekä tulehduskuljetusta että solunulkoisen matriisin aktivoitumista, jotka ovat munuaisten fibroosin keskeisiä aiheuttajia [42]. Lisänäyttöä saadaan hypertensiomalleista, joihin liittyy krooninen munuaisvaurio. Liao et al. (2010) antoivat Ac-SDKP:tä annoksena 800 µg/kg/vrk rotille 5/6 nefrektomian jälkeen joko ennen vaurioita (ennaltaehkäisy) tai vaurioiden jälkeen (kumoaminen). Huolimatta jatkuvasta verenpaineesta ja vasemman kammion hypertrofiasta hoito vähensi albumiinuriaa, vähensi makrofagi-infiltraatiota ja vähensi munuaisten kollageenitasoja molemmissa ryhmissä. Myös nefriinin häviäminen glomeruluksissa säilyi osittain tai palautui, mikä viittaa suodatusesteen eheyden paranemiseen. Nämä havainnot korostavat, että peptidi tarjosi munuaissuojaa sekä taudin varhaisessa että pitkälle edenneessä vaiheessa lähinnä anti-inflammatoristen ja anti-fibroottisten vaikutusten kautta eikä niinkään verenpaineen hallinnan kautta [43].

Aldosteronin ja suolan aiheuttamassa verenpaineessa peptidi vähensi arpeutumista sekä sydämessä että munuaisissa vaikuttamatta verenpaineeseen. Peng ym. (2001) tutkivat rottia, joilta oli poistettu yksi munuainen, ja jotka olivat

sai aldosteronia ja suolaa kuuden viikon ajan. Tämä hoito nosti verenpainetta, suurensi sydäntä ja munuaisia ja lisäsi arpikudosta (kollageenia) sekä solujen kasvumarkkereita (PCNA). Ac-SDKP:n anto, erityisesti korkeampana annoksena 800 µg/kg/vrk, vähensi merkittävästi kollageenia ja PCNA:ta annosriippuvaisesti. Tärkeää on, että verenpaine ja elinten laajeneminen pysyivät ennallaan, kun taas pienemmällä annoksella (400 µg/kg/vrk) saatiin osittaista hyötyä [44]. Immuunivälitteisessä munuaistaudissa peptidi paransi munuaisten toimintaa ja vähensi fibroosia. Omata ym. (2006) hoitivat rottia, joilla oli anti-GBM-nefriitti, alkaen 14 päivää taudin puhkeamisen jälkeen Ac-SDKP:llä annoksella 1 mg/kg/vrk neljän viikon ajan. Verrattuna käsittelemättömiin eläimiin se vähensi virtsan proteiinipitoisuuksia, pienensi plasman urea- ja kreatiniinipitoisuuksia ja paransi kreatiniinipuhdistumaa. Kudosanalyysi osoitti vähemmän glomeruluskleroosia ja interstitiaalista fibroosia. Mekanistisesti se vähensi fibronektiinin, kollageenin ja TGF-β1:n tasoja, vähensi Smad2-signalointia, lisäsi Smad7:ää ja vähensi makrofagien kertymistä munuaiskudokseen [45]. Diabeteksessa peptidi esti munuaisten arpeutumista estämällä verisuonisoluja muuttumasta arpia muodostaviksi soluiksi. Nagai ym. (2014) osoittivat, että Ac-SDKP palautti luonnolliset suojapolut, mukaan lukien let-7-mikroRNA:n ja FGF-reseptorin signalointi, jotka diabetes oli estänyt. Tämän seurauksena se vähensi fibroosia ja endoteelin ja mesenkyymin välistä siirtymää (EndMT). Tärkeää on, että sen yhdistelmä ACE:n estäjän kanssa paransi munuaisten suojaa jopa enemmän kuin ACE:n esto yksinään [46].

Toisessa tutkimuksessa peptidi palautti munuaisten terveen aineenvaihdunnan ja vähensi fibroosia. Srivastava ja muut (2020) vertasivat ACE:n estäjiä, ARB-lääkkeitä, Ac-SDKP:tä ja niiden yhdistelmiä diabetesta sairastavilla hiirillä. He estivät myös sen luonnollisen muodostumisen proliinioligopeptidaasin estäjällä (POPi). Tulokset osoittivat, että Ac-SDKP välitti ACE:n estäjien vaikutuksia ohjelmoimalla uudelleen munuaisten aineenvaihduntaa: SIRT3 palautui, mitokondriaalinen rasvahappojen hapetus parani ja epänormaali glukoosin käyttö väheni. Sitä vastoin POPi vähensi luonnollisia tasoja, kiihdytti fibroosia ja häiritsi aineenvaihdunnan tasapainoa. Tärkeää on, että ACE:n estäjät (mutta eivät ARB:t) palauttivat osittain sen tasot ja vähensivät fibroosia. Sekä ACE:n estäjät että Ac-SDKP vähensivät mesenkymaalista remodellia ja pienensivät kollageeni I:n ja fibronektiinin tasoja diabeettisissa munuaisissa [47].

Syöpähoidossa Ac-SDKP-analogi auttoi säilyttämään verisoluja kemoterapian aikana. Carde ja muut (1992) testasivat seraspenidiä kaksoissokkoutetussa, ristiinkytketyssä vaiheen I-II tutkimuksessa, johon osallistui 53 potilasta, jotka saivat sytarabiinia tai ifosfamidia. Verrattuna kontrollijaksoihin seraspenidillä hoidetuilla potilailla perifeeriset verisolut olivat paremmin suojassa kemoterapian toksisuutta vastaan. Se oli hyvin siedetty eikä sillä ollut haittavaikutuksia. Nämä tulokset viittaavat siihen, että Ac-SDKP:n kaltaiset peptidit voivat suojata luuydintä sytotoksisen hoidon aikana [48]. Toisessa tutkimuksessa peptidi ei vähentänyt veren toksisuutta, mutta oli turvallinen. Cappelaere et al (1995) tutkivat 84 potilasta, joilla oli pitkälle edennyt levyepiteelisyöpä ja jotka saivat karboplatiinia ja jatkuvaa 5-fluorourasiiliannosta sekä

lumelääkettä tai goralatidia (Ac-SDKP) annoksella 12,5 tai 62,5 µg/kg/vrk. Sytostaattihoidon 221 syklin aikana ryhmien välillä ei ollut eroja leukosyyttien, granulosyyttien, verihiutaleiden tai hemoglobiinin alimmissa veriarvoissa. Myös toksisuuden kesto pysyi muuttumattomana. Anemia ja lymfopenia olivat kuitenkin yleisempiä goralatidilla. Kaiken kaikkiaan lääke oli hyvin siedetty, mutta näillä annoksilla se ei estänyt kemoterapiaan liittyvää verisolukatoa [49].

Sekä tyypin 1 että tyypin 2 diabeteksessa peptidi paransi arpia ja munuaisten toimintaa. Nitta ym. (2016) hoitivat CD-1-hiiriä, joilla oli streptotsototsiinin aiheuttama tyypin 1 diabetes, ja db/db-hiiriä, joilla oli tyypin 2 diabetes, suun kautta otettavalla Ac-SDKP:llä, imidapriilillä (ACE:n estäjä) tai molemmilla lääkkeillä yhdessä. Suun kautta annettu hoito joko yksin tai yhdessä vähensi glomeruluskleroosia ja tubulointerstitiaalista fibroosia. Plasman kystatiini C -pitoisuudet, jotka ovat koholla munuaissairauksissa, palautuivat normaaleiksi. Kaikki hoitomuodot palauttivat tukahdutetut fibroottista vaikutusta vähentävät mikroRNA:t (miR-29 ja let-7), ja suurin parannus havaittiin yhdistelmähoitoa saaneessa ryhmässä. Virtsan peptidipitoisuudet olivat korkeimmat yhdistelmähoitoa saaneessa ryhmässä, mikä viittaa parantuneeseen systeemiseen altistumiseen [50]. Immuunivälitteisen munuaissairauden osalta tämä alensi virtsan proteiinipitoisuuksia ja vähensi tulehdusta ja fibroosia. Tan et al. (2012) antoivat lupusta sairastaville hiirille MRL/lpr 1,0 mg/kg/vrk 8 viikon ajan. Verrattuna hoitamattomiin lupusta sairastaviin hiiriin peptidiä saaneilla hiirillä oli vähemmän proteinuriaa ja parempi munuaisten toiminta. Munuaiskudoksessa oli vähemmän tunkeutuvia T-soluja ja makrofageja. Mekanistisesti NF-κB-aktivaatio ja TNF-α-tuotanto vähenivät ja pro-fibroottisten merkkiaineiden (TGF-β1, α-SMA ja fibronektiini) määrä väheni. Smad2/3:n fosforylaatio estyi ja Smad7:n lisääntyi. Tärkeää on, että immuunikompleksien laskeutuminen ja anti-dsDNA-vasta-ainepitoisuudet eivät muuttuneet, mikä viittaa siihen, että hyödyt johtuivat pikemminkin tulehduksen ja fibroosin vähenemisestä kuin vasta-aineiden muodostumisen muutoksesta [51].

Lihavuuden ja runsaan suolan saannin yhteydessä se suojasi munuaisia vähentämällä tulehdusta, fibroosia ja jopa verenpainetta. Maheshwari et al. (2018) tutkivat Zucker laihoja (ZL) ja Zucker lihavia (ZO) rottia, joita ruokittiin 8 viikon ajan normaalilla suolalla (0,4%) tai korkealla suolapitoisuudella (4%), ja ZO-alaryhmä sai

1,6 mg/kg/vrk. Korkea suolapitoisuus pahensi munuaistulehdusta ja -fibroosia molemmissa ryhmissä, ja lihavilla rotilla makrofagien infiltraatio oli vakavinta (87,8 ± 10,8 solua/mm² verrattuna 19,14 ± 1,5 solua/mm² laihoilla rotilla). Hoito vähensi makrofagi-infiltraatiota lihavilla rotilla 32,18 ± 2,4 soluun/mm² (P<0,05) ja vähensi glomeruluskleroosia sekä interstitiaalista fibroosia sekä aivokuoressa että medullaa (P<0,05). Suolalla ruokittujen lihavien rottien systolinen verenpaine laski myös 164 ± 6,9:stä 144,05:een.

± 14,1 mmHg (P=0,004). Albuminuria oli suurempi lihavilla rotilla kuin laihoilla rotilla, mutta suolan saanti tai hoito ei muuttanut sitä merkittävästi [52].

Ac-SDKP aivojen ja hermojen terveydelle (eläinkokeiden perusteella).

Suojaus Parkinsonin taudin malleissa

Tämä peptidi auttaa suojaamaan dopamiinia tuottavia hermosoluja ja parantaa motorisia taitoja ja muistia Parkinsonin taudin malleissa. Kamarehei ja Zahednasab (2025) osoittivat ensimmäisenä solukokeissa, että SH-SY5Y-hermosolujen esikäsittely 20 nM:lla tätä peptidiä suojasi niitä 6-OHDA:lta, toksiinilta, jota käytetään yleisesti Parkinsonin taudin jäljittelyyn. Rotilla tehdyissä tutkimuksissa päivittäiset 800 µg/kg:n annokset 6-OHDA:n aivovaurion jälkeen säilyttivät enemmän dopamiinineuroneja ja vähensivät solukuolemaa vähentämällä kaspaasi-3:n ja kaspaasi-12:n aktiivisuutta. Käsitellyillä rotilla havaittiin myös parempi motorinen koordinaatio, parempi avaruudellinen muisti ja vähemmän ahdistus- ja masennusoireita. Mekanistisesti hyödyt johtuivat vähentyneestä oksidatiivisesta stressistä, lieventyneestä endoplasmisen retikulumin (ER) stressistä ja vähentyneistä tulehdussignaaleista aivoissa, mikä edistää hermosolujen selviytymistä ja uudistumista [53].

Regeneroituminen selkäydinvamman jälkeen

Se myös nopeuttaa toipumista ja ohjaa tulehdusta paranemiseen selkäydinvamman jälkeen. Hashemizadeh ja muut (2022) antoivat 0,8 mg/kg ihonalaisesti Wistar-rotille kerran päivässä seitsemän päivän ajan, alkaen kahdesta kuuteen tuntia painon laskun aiheuttaman selkäydinvamman jälkeen. Verrattuna käsittelemättömiin eläimiin hoidetut rotat toipuivat paremmin kävelykyvyltään, menettivät vähemmän liikehermosoluja ja niillä oli alhaisemmat TNF-α:n (pro-inflammatorinen signaali) ja kaspaasi-3:n tasot. Samalla ikääntymistä edistävien M2-makrofagien merkkiaineen CD206:n mRNA-taso kasvoi. Kudostutkimukset osoittivat pienempiä vaurioalueita. Kaiken kaikkiaan hoito muutti immuunivasteen vahingollisesta M1-tyyppisestä toiminnasta suojaavaan M2-tyyppiseen toimintaan, mistä oli sekä toiminnallisia että rakenteellisia hyötyjä [54].

Suojautuminen traumaattisen aivovamman jälkeen (TBI)

Ac-SDKP auttaa suojaamaan aivoja ja edistää aivojen korjaantumista, kun sitä annetaan pian vamman jälkeen. Zhang et al. (2017) aiheuttivat rotille kontrolloituja aivokuoren vammoja ja antoivat tätä ainetta (0,8 mg/kg/vrk) niille minipumpun kautta kolmen päivän ajan, alkaen tunnin kuluttua vammasta. Päivästä 7 päivään 35 sensoris-motoriset testipisteet paranivat, ja päivinä 33-35 myös avaruudellinen oppiminen oli parempaa kontrolliryhmään verrattuna (p < 0,05). Tutkimuksen loppuun mennessä aivokuoren vaurioiden määrä ja hippokampuksen neuronien menetys olivat vähentyneet, kun taas verisuonten kasvu, uusien neuronien muodostuminen ja dendriittisten piikkien tiheys olivat suurempia. Varhainen hoito vähensi myös fibriinin kertymistä ja vaimensi immuunisolujen aktivoitumista. Mekanistiset testit osoittivat, että TGF-β1/NF-κB-signaloinnin estäminen selitti suuren osan anti-inflammatorisesta vaikutuksesta [55].

Hyödyt multippeliskleroosia (MS) muistuttavassa taudissa.

Se vähentää myös aivojen stressiä ja tulehdusta multippeliskleroosin malleissa. Pejman ja muut (2020) altistivat C57BL/6-hiiret kokeelliselle autoimmuuni enkefalomyeliitille (EAE). Tyypillisesti EAE lisää ER-stressin merkkiaineita (kaspaasi-12, CHOP, PDI), oksidatiivista stressiä ja immuunisolujen virtausta hippokampukseen. Hoidon myötä oligodendrosyyttien kaspaasi-12- ja CHOP-tasot laskivat, kaspaasi-3-aktivaatio väheni, ROS-oksidaatio ja lipidiperoksidaatio vähenivät, antioksidanttikapasiteetti parani ja IL-6/IL-1β-tasot laskivat. Aivokuvaukset vahvistivat, että hippokampuksessa oli vähemmän vaurioita ja immuunisolujen infiltraatio oli vähäisempää, mikä viittaa taudin hitaampaan etenemiseen [56].

Ac-SDKP maksan terveydelle (eläinkokeiden perusteella)

Hidastaa kemikaalien aiheuttamaa maksan arpeutumista.

Ac-SDKP-peptidi auttaa suojaamaan maksaa kemiallisilta vaurioilta säätelemällä keskeistä geenikytkintä ja kasvureittiä. Wei et al. (2022) tutkivat rotilla hiilitetrakloridin (CCl₄) aiheuttamia maksavaurioita ja havaitsivat, että tähtipesäkesolujen - maksan tärkeimpien arpia muodostavien solujen - kuolema oli vähäisempää. Myös fibroosi väheni. Mekanistiset testit osoittivat, että hoito vähensi WTAP-tasoja, entsyymiä, joka lisää m⁶A-merkkejä RNA:han. Tämä muutos vakautti RNA Ptch1:tä ja sääti arpien muodostumisen tärkeimmän aiheuttajan, Hedgehog-reitin, toimintaa. Kaiken kaikkiaan tulokset korostavat fibroottista vaikutusta WTAP/m⁶A/Ptch1-reitin kautta, joka säätelee Hedgehog-signalointia [59].

Suojaus sappiteiden aiheuttamassa fibroosissa

Ac-SDKP suojaa maksaa myös silloin, kun sappitukos aiheuttaa arpeutumista. Zhang et al. (2012) käyttivät rotilla sappitiehyiden ligaatiomallia (BDL) ja hoitivat niitä jatkuvasti kahden viikon ajan. Verrattuna käsittelemättömiin eläimiin peptidiä saaneilla eläimillä TGF-β1-signalointi oli estynyt ja aktivoituneisiin tähtisoluihin liittyvien merkkiaineiden (α-SMA, FSP-1) pitoisuudet olivat alhaisemmat. Myös kollageeniin liittyvien geenien (Col I, Col III) ja entsyymien (MMP-2, TIMP-1, TIMP-2) ilmentyminen oli vähentynyt. Maksan toimintaan liittyvät veren merkkiaineet paranivat, ja ALT, AST, bilirubiini ja protrombiiniaika lähestyivät normaalia. Kudosvalmisteissa havaittiin vähemmän syöttösoluja, vähemmän kollageenin kertymistä ja fibroosin ja tulehduksen yleistä vähenemistä [60].

Luonnollisten puolustus- ja korjaussignaalien ylläpito

Se auttaa maksaa säilyttämään luonnollisen vastustuskykynsä pitkittyneiden kemiallisten vaurioiden aikana. Chen et al. (2010) havaitsivat, että jatkuvassa CCl₄-altistuksessa peptidin luonnolliset pitoisuudet vähenivät ajan myötä. Sen korvaaminen infuusiona (800 µg/kg/vrk kahdeksan viikon ajan) säilytti perustason tasot ja vähensi maksavaurioita, tulehdusta ja fibroosia. Veren maksaentsyymiarvot laskivat, CD45⁺-tulehdussolut vähenivät.

ja kollageeni- ja α-SMA-kertymät vähenivät. Pro-fibroottiset signaalit, kuten TGF-β1 ja fosfo-Smad2/3, vähenivät, kun taas korjaukseen liittyvät signaalit, BMP-7 ja fosfo-Smad1/5/8, lisääntyivät. Solumäärityksissä se esti suoraan stellatesolujen aktivaation, mikä vahvistaa fibroottista vaikutusta solutasolla [61].

Ac-SDKP ihon ja kudosten korjaamiseen (eläinkokeiden perusteella) H3. Hydrogeelinen iholiima nopeuttaa paranemista ja vähentää arpia.

Erityinen selluloosapohjainen iholiima (Dopa-OCMC-PAA, verrattuna OCMC-PAA:han) kehitettiin kuljettamaan ja vapauttamaan Ac-SDKP:tä. Molemmat versiot osoittivat hyviä turvotus- ja hajoamisprofiileja, suurta mekaanista lujuutta ja turvallisuutta solujen kanssa käytettäväksi, mutta Dopa-OCMC-PAA toimi parhaiten. Hiirillä, joilla oli maksaverenvuoto, tämä liima pysäytti verenvuodon nopeammin. Fibroblasteilla tehdyissä testeissä se lisäsi kudoksen uudelleenmuodostuksesta vastaavien entsyymien (MMP-1 ja MMP-3) tasoja ja vähensi kollageenigeenien aktiivisuutta. Kaneilla, joilla oli paksuuntuneita korva-arpia, Dopa-OCMC-PAA yhdistettynä peptidiin vähensi arpien pistemäärää, vähensi solujen lukumäärää, paransi kollageenirakennetta ja osoitti jälleen korkeampia MMP-1/MMP-3-tasoja ja alhaisempaa kollageenigeenien aktiivisuutta. Yhteenvetona nämä tulokset osoittivat parempaa haavan paranemista ja vähemmän arpia [62].

Paikallinen käyttö parantaa ihon selviytymistä ja korjautumista.

Rotilla tehdyissä iholäppäleikkauksissa (vatsa- ja selkäleikkauksissa) Ac-SDKP:n injektiot annoksella 5 µg/kg kahdesti päivässä kolmen päivän ajan lisäsivät terveen ihon selviytymistä. Elinkelpoisen läpän pinta-ala kasvoi 50,9 ± 19,3%:stä 66,4 ± 7,5%:iin vatsaläpän kohdalla ja 53,4 ± 4,2%:stä 74,7 ± 6,6%:iin selän läpän kohdalla. UVB:n vaurioittaman ihokudoksen kohdalla paikallinen käyttö paransi eloonjäämistä. Paikallinen levitys nopeutti myös uuden ihon kasvua, lisäsi keratiini-14:n tasoja (ihoa rakentavien solujen merkkiaine) ja lisäsi fibronektiinin tasoja, mikä osoittaa sen roolin verisuonten kehityksessä ja korjaamisessa [63].

Veren muodostumisen suojaaminen kemoterapian aikana

Sytostaattihoitolääkettä doksorubisiinia saaville hiirille Ac-SDKP:n antaminen annoksena 2,4 µg/vrk (jatkuvasti tai jaettuna) alkaen 48 tuntia ennen hoitoa vähensi kuolleisuutta ja suojasi verenmuodostuksesta vastaavia kantasoluja (LTRC, CFU-S, HPP-CFC ja CFU-GM). G-CSF:n lisääminen nopeutti edelleen CFU-GM:n toipumista. Antamisen ajoitus oli ratkaisevan tärkeää - lyhyen aikavälin luuydinvaurioilta ja pitkän aikavälin kantasolukadolta suojaamiseksi oli välttämätöntä aloittaa antaminen ennen kemoterapiaa [64].

Vahvempi fibroottinen vaikutus, joka johtuu parannetuista analogeista ja ACE:n estäjien yhdistelmästä.

Keuhkojen fibroblasteilla tehdyissä kokeissa Ac-SDKP:n ACE-resistentti muoto vähensi arpeutumissignaaleja (TGF-β/Smad3) ja kollageenin kertymistä paremmin kuin luonnollinen muoto. Lyhennetyllä fragmentilla (Ac-DKP) oli vain heikko vaikutus, ja ACE hajotti sen hitaasti. Yhdessä ACE:n estäjien kanssa peptidi esti hydroksiproliinin (kollageenin merkkiaine) kertymistä enemmän kuin yksinään, mikä osoitti voimakkaampaa vaikutusta ja kliinistä potentiaalia. Annoksilla 10-⁶-10¹⁷ M sekä tymosiiniβ4 (Tβ4) että peptidi vähensivät syöttösolujen kasvua (parhaiten 10-¹⁴ M:n annoksella) ja aiheuttivat epätavallisia solusyklin pysähtymiseen liittyviä ydintymismuutoksia. Pitoisuudessa 10-⁸ M ne myös indusoivat kemikaalien vapautumista syöttösoluista (degranulaatio), ja peptidin vaikutus oli voimakkaampi (~89%) kuin Tβ4:n (~57%). Muilla Tβ4-fragmenteilla ei ollut vaikutusta, mikä osoittaa, että vaikutus oli spesifinen ehjälle Tβ4:lle ja peptidille [65, 66].

Ac-SDKP-annos

Prekliinisissä tutkimuksissa Ac-SDKP:tä annetaan useimmiten ihon alle minipumpun kautta annoksena noin 0,8 mg/kg/vrk fibroosin ja tulehduksen vähentämiseksi sydämessä/verisuonistossa ja munuaisissa. Hiirillä sydäninfarktin jälkeen tehdyissä tutkimuksissa käytetään joskus annosta 1,6 mg/kg/vrk varhaisen suojan aikaansaamiseksi. Aivoissa/neuroneissa käytetään yleensä annosta noin 0,8 mg/kg/vrk 3-7 päivän ajan lyhyissä sykleissä, jotka aloitetaan tuntien kuluessa vammasta. Solututkimuksissa on tavallista esikäsitellä noin 10 nM:n annoksella. Maksassa fibroosin vastaisissa protokollissa annos noin 0,8 mg/kg/vrk annetaan usein kroonisen vamman aikana. Keuhkoissa bleomysiinimallissa käytettiin annosta 0,6 mg/kg vatsaontelonsisäisesti toistuvilla annoksilla alkaen päivästä 0 tai päivästä 7. Ihon/haavan korjauksessa paikalliseen annosteluun sisältyi 5 µg/kg injektiota kohti kahdesti päivässä kolmen päivän ajan tai peptidejä sisältäviä hydrogeelejä paikallista vapautumista varten. Hematologiassa/luuytimen korjauksessa käytetään hyvin pieniä mikrogramma-annoksia, kuten 2,4 µg/vrk hiirillä ennen kemoterapiaa ja lyhyitä hoitoja µg/kg/vrk varhaisissa kliinisissä tutkimuksissa.

Vastuuvapauslauseke

Tämä artikkeli on kirjoitettu koulutustarkoituksessa, ja sen tarkoituksena on lisätä tietoisuutta käsiteltävästä aineesta. On tärkeää huomata, että artikkeli koskee ainetta yleisesti - se ei ole kuvaus tietystä tuotteesta (kemiallisesta reagenssista). Emme ehdota kemiallisten reagenssien käyttöä ihmisiin - se on laissa kielletty, sillä jotta tuotetta voidaan käyttää hoitoon, se on rekisteröitävä lääkkeeksi. Tekstin sisältämät tiedot perustuvat saatavilla olevaan tieteelliseen tutkimukseen, eikä niitä ole tarkoitettu lääketieteelliseksi neuvonnaksi tai itsehoidon edistämiseksi. Lukijan tulisi neuvotella pätevän terveydenhuollon ammattilaisen kanssa kaikissa terveys- ja hoitopäätöksissä.

Viitteet

1. Wang, W., Jia, W. ja Zhang, C. (2022). Tβ4-POP-Ac-SDKP-akselin rooli elinfibroosissa. Kansainvälinen molekyylitieteiden aikakauslehti, 23(21), 13282. https://doi.org/10.3390/ ijms232113282
2. Nakagawa, P., Romero, C. A., Jiang, X., D'Ambrosio, M., Bordcoch, G., Peterson, E. L., Harding, P., Yang, X. P. ja Carretero, O. A. (2018). Ac-SDKP vähentää kuolleisuutta ja sydämen repeämisriskiä akuutin sydäninfarktin jälkeen. PLoS One, 13(1), e0190300. https://doi.org/10.1371/ journal.pone.0190300 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29364896/
3. Peng, H., Carretero, O. A., Brigstock, D. R., Oja-Tebbe, N. ja Rhaleb, N. E. (2003). Ac-SDKP kumoaa sydämen fibroosin rotilla, joilla on munuaisverisuonten hypertensio. Hypertensio, 42(6), 1164–1170. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000100423.24330.96 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14581293/
4. Yang, F., Yang, X. P., Liu, Y. H., Xu, J., Cingolani, O., Rhaleb, N. E., & Carretero, O. A. (2004). Ac-SDKP kumoaa tulehduksen ja fibroosin rotilla, joilla on sydämen vajaatoiminta sydäninfarktin jälkeen. Hypertensio, 43(2), 229-236. https://doi.org/10.1161/01.HYP.0000107777.91185.89 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/ pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14691195/.
5. Rasoul, S., Carretero, O. A., Peng, H., Cavasin, M. A., Zhuo, J., Sanchez-Mendoza, A., Brigstock,

D. R. ja Rhaleb, N. E. (2004). Ac-SDKP:n ja angiotensiinikonvertaasientsyymin eston fibroottisia vaikutuksia hypertensiossa. Journal of Hypertension, 22(3), 593-603. https://doi.org/ 10.1097/https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166//00004872-200403000-00023 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15076166/

6. Rhaleb, N. E., Peng, H., Harding, P., Tayeh, M., LaPointe, M. C. ja Carretero, O. A. (2001). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin vaikutukset DNA:n ja kollageenin synteesiin rotan sydämen fibroblasteissa. Hypertensio, 37 (3), 827-832. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.3.827  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11244003/
7. Liu, Y.-H., D'Ambrosio, M., Liao, T.-D., Peng, H., Rhaleb, N.-E., Sharma, U., André, S., Gabius, H.-J. ja Carretero, O. A. (2009). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini estää nisäkkäiden adheesiota/kasvua säätelevän lektiinin galektiini-3:n aiheuttamaa sydämen remodellistumista ja toimintahäiriöitä. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 296(2), H404-H412. https://doi.org/ 10.1152/ajpheart.00747.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19098114/
8. Rhaleb, N. E., Peng, H., Yang, X. P., Liu, Y. H., Mehta, D., Ezan, E. ja Carretero, O. A. (2001). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin pitkäaikaiset vaikutukset vasemman kammion kollageenin kertymiseen rotilla, joilla on kahden munuaisen vaurioitumisen ja toisen munuaisen puristamisen aiheuttama hypertensio. Circulation, 103(25), 3136-3141. https://doi.org/ 10.1161/01.cir.103.25.3136. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11425781/.
9. Cavasin M. A. (2006). Tymosiini beta4:n ja sen N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin (Ac-SDKP) johdannaisen terapeuttinen potentiaali sydämen hoidossa sydäninfarktin jälkeen. American journal of cardiovascular drugs : lääkkeet, laitteet ja muut interventiot., 6(5), 305-311. https://doi.org/ 10.2165/00129784-00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
10. Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. C., Peng, H., Peterson, E., Harding, P., Yang, X. P. ja Carretero, O. A. (2013). N-asetyyli-Ser-Asp-Lys-Pro estää interleukiini-1β:n aiheuttamaa matriksin metalloproteinaasiaktivaatiota sydämen fibroblasteissa. Pflügers Archiv - European Journal of

Fysiologia, 465(10), 1487-1495. https://doi.org/10.1007/s00424-013-1262-8 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23652767/

11. Nakagawa, P., Liu, Y., Liao, T. D., Chen, X., González, G. E., Bobbitt, K. R., Smolarek, D., Peterson, E. L., Kedl, R., Yang, X. P., Rhaleb, N. E. ja Carretero, O. A. (2012). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinihoito ehkäisee kokeellista autoimmuunimyokardiittia rotilla. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 303(9), H1114-H1127. https:// doi.org/10.1152/ajpheart.00300.2011 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22923621/
12. González, G. E., Rhaleb, N. E., Nakagawa, P., Liao, T. D., Liu, Y., Leung, P., Dai, X., Yang, X. P. ja Carretero, O. A. (2014). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini vähentää sydämen kollageenin ristisidostumista ja tulehdusta angiotensiini II:n aiheuttamassa hypertensiivisessä rotassa. Kliininen tiede, 126(1), 85-

13. Peng, H., Xu, J. ja Yang, X. P., Kassem, K. M., Rhaleb, I. A., Peterson, E. ja Rhaleb, N. E. (2019). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinihoito suojaa sydäntä liialliselta sydänlihasvauriolta ja sydämen vajaatoiminnalta hiirillä. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 97(8), 753-765. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047. https://doi.org/10.1139/cjpp-2019-0047 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30998852/
14. Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Perego, C., Perego, L., Mancini, M., Leopizzi, M., Corradi, B., Perlini, S., Zerbini, G. ja Stella, A. (2009). Sydänlihaksen fibroosin ehkäisy N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinilla diabeettisilla rotilla. Kliininen tiede, 118(3), 211-220. https:// doi.org/10.1042/cs20090234. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20310083/
15. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Baird, A., Chen, M., Xu, S., Sexton, S., Singh, A. K., Groman, A., Turowski, S. G., Spernyak, J. A., Mahajan, S. D. ja Pokharel, S. (2018). Uuden Ac-SDKP-peptidin vaikutukset säteilyn aiheuttamiin sepelvaltimoiden endoteelivaurioihin ja sydänlihaksen lepovirtaukseen. Sydän-onkologia, 4, 8. https://doi.org/10.1186/s40959-018-0034-1  https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31057947/
16. Suhail, H., Peng, H., Matrougui, K. ja Rhaleb, N. E. (2024). Ac-SDKP heikentää ER-stressin stimuloimaa kollageenin tuotantoa sydämen fibroblasteissa CHOP-välitteisen NF-κB:n ilmentymisen eston kautta. Frontiers in Pharmacology, 15, 1352222. https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1352222 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38495093/
17. Zhu, L., Yang, X. P., Janic, B., Rhaleb, N. E., Harding, P., Nakagawa, P., Peterson, E. L. ja Carretero, O. A. (2016). Ac-SDKP estää TNF-α:n indusoimaa ICAM-1-ekspressiota endoteelisoluissa IκB-kinaasin ja NF-κB-aktivoitumisen estämisen kautta. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 310(9), H1176-H1183. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00252.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26945075/
18. Lin, C. X., Rhaleb, N. E., Yang, X. P., Liao, T. D., D'Ambrosio, M. A. ja Carretero, O. A. (2008). Aortan fibroosin ehkäisy N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinilla angiotensiini II:n aiheuttamassa verenpaineessa. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 295(3), H1253-H1261. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00481.2008 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18641275/
19. Sharma, U. C., Sonkawade, S. D., Spernyak, J. A., Sexton, S., Nguyen, J., Dahal, S., Attwood, K. M., Singh, A. K., van Berlo, J. H. ja Pokharel, S. (2018). Pieni peptidi Ac-SDKP estää

säteilyn aiheuttama kardiomyopatia. Circulation: Heart Failure, 11(8), e004867. https://doi.org/ 10.1161/CIRCHEARTFAILURE.117.004867 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30354563/

20. Conte, E., Iemmolo, M., Fruciano, M., Fagone, E., Gili, E., Genovese, T., Esposito, E., Cuzzocrea, S. ja Vancheri, C. (2015). Tymosiini β4:n ja sen N-terminaalisen fragmentin Ac-SDKP:n vaikutukset TGF-β-käsiteltyihin ihmisen keuhkofibroblasteihin ja bleomysiinin aiheuttaman keuhkofibroosin hiirimallissa. Biologista hoitoa koskeva asiantuntijalausunto, 15(Suppl 1), S211-S221. https://doi.org/ 10.1517/14712598.2015.1026804 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26098610/
21. Liu, S., Jin, R., Zheng, G., Wang, Y., Li, Q., Jin, F., Li, Y., Li, T., Mao, N., Wei, Z., Li, G., Fan, Y..,

Xu, H., Li, S. ja Yang, F. (2023). Ac-SDKP edistää KIF3A-välitteistä β-kateniinin estoa säiemekanismin kautta silika-indusoidun epiteeli-myofibroblastisen transformaation rajoittamiseksi. Biomedicine & Pharmacotherapy, 166, 115411. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2023.115411 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37651800/

22. Cai, J., Chen, Q., Mehrabi Nasab, E. ja Athari, S. S. (2022). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-proliinin ja vasoaktiivisen suolistopeptidin immunomoduloivat vaikutukset kroonisen obstruktiivisen keuhkosairauden patofysiologiaan. Fundamental & Clinical Pharmacology, 36(6), 1005-1010. https:// doi.org/10.1111/fcp.12811. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35763864/
23. Wang, J., Qian, Y., Gao, X., Mao, N., Geng, Y., Lin, G., Zhang, G., Li, H., Yang, F. ja Xu, H. (2020). Uuden Ac-SDK (biotiini) -proliinipeptidin synteesi ja tunnistaminen, joka voi indusoida anti-fibroottisia vaikutuksia silikoosista kärsivillä rotilla. Lääkkeiden suunnittelu, kehittäminen ja hoito, 14, 4315–4326. https://doi.org/10.2147/DDDT.S262716 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33116418/
24. Conte, E., Fagone, E., Gili, E., Fruciano, M., Iemmolo, M., Pistorio, M. P., Impellizzeri, D., Cordaro, M., Cuzzocrea, S., & Vancheri, C. (2016). N-terminaalisen tymosiini β4-fragmentin Ac-SDKP:n ennaltaehkäisevät ja terapeuttiset vaikutukset bleomysiinin aiheuttamassa keuhkofibroosimallissa. Oncotarget, 7(23), 33841-33854. https://doi.org/10.18632/oncotarget.8409 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27029074/
25. Cao, W., Yao, S. S. S., Gong, H. B., Zhu, L. Y., Miao, Z. Y. ja Deng, H. J. (2022). Ac-SDKP:n säätelevä vaikutus fosforyloituun lämpösokkiproteiini 27/SNAI1-reittiin silikoosin saaneilla rotilla. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 40(2), 90-96. https://doi.org/10.3760/ cma.j.cn121094-20201218-00702 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35255573/
26. Gong, H. B., Zhang, C. M., Tang, X. Y., Gong, R. B., Miao, Z. Y. ja Deng, H. J. (2023). Meta-analyysi keuhkofibroosin estämisestä Ac-SDKP:llä eläinmalleissa. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Osoitteeseen Zhi, 41 (4), 262-270. https://doi.org/10.3760/  cma.j.cn121094-20211115-00565 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37248179/
27. Li, Q., Yang, F., Zhang, L.-J., Yan, J.-B., Chen, P., Li, D.-D. ja Wu, K.-F. (2009). [N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin fibroottista vaikutusta vähentävä vaikutus transformoivan kasvutekijä beetan ja sidekudoksen kasvutekijän ilmentymisen säätelyn kautta silikoosin saaneilla rotilla]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 27(7), 390-394. PMID: 20039536 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20039536/.

28.Yan, J.-B., Zhang, L.-J. ja Li, Q. (2008). [N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyyli-proliinin fibroottinen vaikutus silikoosin saaneiden rottien keuhkoissa]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi, 26(7), 401-405. PMID: 19080377. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19080377/

• Jin, F., Geng, F., Xu, D., Li, Y., Li, T., Yang, X., Liu, S., Zhang, H., Wei, Z., Li, S., Gao, X., Cai, W..,

Mao, N., Yi, X., Liu, H., Sun, Y., Yang, F. ja Xu, H. (2021). Ac-SDKP vaimentaa keuhkomakrofagien ja luun osteoklastien aktivoitumista piidioksidille altistuneilla rotilla estämällä TLR4- ja RANKL-signalointireittejä. Journal of Inflammation Research, 14, 1647-1660. https://doi.org/10.2147/ JIR.S306883 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33948088/

30. Xu, H., Yang, F., Sun, Y., Yuan, Y., Cheng, H., Wei, Z., Li, S., Cheng, T., Brann, D. ja Wang, R. (2012). Ac-SDKP:n uusi fibroosinestokohde: myofibroblastien erilaistumisen estäminen silikoosia sairastavien rottien keuhkoissa. PLoS Yksi, 7(7), e40301. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0040301 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22802960/
31. Wang, X., Liu, Y., Xu, H., Zhang, X., Li, S., Xu, D., Gao, X., Zhang, L., Zhang, B., Wei, Z., Wang, R., Brann, D. ja Yang, F. (2016). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin (Ac-SDKP) säätelemä asetyloitu α-tubuliini vaikuttaa anti-fibroottisesti silikoosin aiheuttamassa rotan keuhkofibroosissa. Scientific Reports, 6, 32257. https://doi.org/10.1038/srep32257 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27577858/
32. Deng, H., Xu, H., Zhang, X., Sun, Y., Wang, R., Brann, D. ja Yang, F. (2016). Ac-SDKP:n suojaavat vaikutukset follikulaarisiin epiteelisoluihin TGF-β1/ROCK1-reitin välittämällä EMT:n estolla silikoosissa rotilla. Toksikologia ja soveltava farmakologia, 294, 1-10. https://doi.org/10.1016/ j.taap.2016.01.010 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26785300/
33. Zhang, L., Xu, D., Li, Q., Yang, Y., Xu, H., Wei, Z., Wang, R., Zhang, W., Liu, Y., Geng, Y., Li, S., Gao, X. ja Yang, F. (2018). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini (Ac-SDKP) lievittää silikoottista fibroosia estämällä tyypin II alveoliepiteelisolujen apoptoosia endoplasmisen retikulum stressin välittämisen kautta. Toksikologia ja soveltava farmakologia, 350, 1-10. https://doi.org/10.1016/ j.taap.2018.04.025 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29684394/
34. Nakagawa, P., Masjoan-Juncos, J. X., Basha, H., Janic, B., Worou, M. E., Liao, T. D., Romero, C. A., Peterson, E. L. ja Carretero, O. A. (2017). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin vaikutukset verenpaineeseen, munuaisvaurioon ja kuolleisuuteen systeemisessä lupus erythematosuksessa. Fysiologiset raportit, 5(2), e13084. https://doi.org/10.14814/phy2.13084 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 28126732/
35. Worou, M. E., Liao, T. D., D'Ambrosio, M., Nakagawa, P., Janic, B., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E. ja Carretero, O. A. (2015). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin suojaavat vaikutukset munuaisiin Dahl-suolalle herkillä rotilla. Hypertensio, 66(4), 816-822. https://doi.org/10.1161/ HYPERTENSIONAHA.115.05970 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26324505/
36. Liao, T. D., Nakagawa, P., Janic, B., D'Ambrosio, M., Worou, M. E., Peterson, E. L., Rhaleb, N. E., Yang, X. P. ja Carretero, O. A. (2015). N-asetyyli-Seryyli-Aspartyyli-Lysyyli-Proliini: munuaisten suojamekanismit systeemisen lupus erythematosuksen hiirimallissa. American Journal of Fysiologia-Renaalinen fysiologia, 308 (10), F1146-F1154. https://doi.org/10.1152/ajprenal.00039.2015 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25740596/

37.Rhaleb, N. E., Pokharel, S., Sharma, U. ja Carretero, O. A. (2011). N-asetyyli-Ser-Asp-Lys-Pro:n munuaisia suojaavat vaikutukset deoksikortikosteroniasetaatti-suolan aiheuttamassa hypertensiivisessä hiiressä. Journal of Hypertension, 29(2), 330-338. https://doi.org/10.1097/HJH.0b013e32834103ee https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/ pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052020/.

• Shibuya, K., Kanasaki, K., Isono, M., Sato, H., Omata, M., Sugimoto, T., Araki, S., Isshiki, K., Kashiwagi, A., Haneda, M. ja Koya, D. (2005). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini estää munuaisten vajaatoimintaa ja mesangiaalisen matriisin proliferaatiota db/db-diabetesta sairastavilla hiirillä. Diabetes, 54(3), 838-845. https://doi.org/10.2337/diabetes.54.3.838. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15734863/
• Castoldi, G., di Gioia, C. R. T., Bombardi, C., Preziuso, C., Leopizzi, M., Maestroni, S., Corradi, B., Zerbini, G. ja Stella, A. (2013). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin antifibroottiset vaikutukset diabeettisten rottien munuaisiin. American Journal of Nephrology, 37(1), 65-73. https://doi.org/10.1159/000346116 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23327833/
• Zhang, R., Hu, Z., Wang, Y., Qiu, R., Wang, G., Wang, L. ja Hu, B. (2022). Biomimeettinen kaksoisverkkohydrogeeli lievittää munuaisten fibroosia ja edistää munuaisten uudistumista. Journal of Materiaalien kemia B, 10 (45), 9424-9437. https://doi.org/10.1039/d2tb01939f  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36378134/
• Zuo, Y., Chun, B., Potthoff, S. A., Kazi, N., Brolin, T. J., Orhan, D., Yang, H.-C., Ma, L.-J., Ma, L.-J., Kon, V., Myöhänen, T., Rhaleb, N.-E., Carretero, O. A. ja Fogo, A. B. (2013). Timosiini β4 ja sen hajoamistuote, Ac-SDKP, ovat uusia korjaavia aineita munuaisfibroosissa. Kidney International, 84(6), 1166-1175. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209. https://doi.org/10.1038/ki.2013.209 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23739235/
• Wang, M., Liu, R., Jia, X., Mu, S. ja Xie, R. (2010). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini lievittää munuaistulehdusta ja tubulointerstitiaalista fibroosia rotilla. International Journal of Molecular Lääketiede, 26 (6), 795-801. https://doi.org/10.3892/ijmm_00000527  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042772/
• Liao, T.-D., Yang, X.-P., D'Ambrosio, M., Zhang, Y., Rhaleb, N.-E., Rhaleb, N.-E. ja Carretero, O. A. (2010). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini lievittää munuaisvaurioita ja toimintahäiriöitä hypertensiivisillä rotilla, joilla on vähentynyt munuaismassa: Hypertension Research Council. Hypertensio, 55(2), 459-467. https://doi.org/10.1161/HYPERTENSIONAHA.109.144568 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 20026760/
• Peng, H., Carretero, O. A., Raij, L., Yang, F., Kapke, A. ja Rhaleb, N. E. (2001). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyyli-proliinin fibroottisia vaikutuksia sydämeen ja munuaisiin aldosteronisuolan aiheuttamalla hypertensiivisellä rotalla. Hypertensio, 37(2 Pt 2), 794-800. https://doi.org/10.1161/01.hyp.37.2.794 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11230375/
• Omata, M., Taniguchi, H., Koya, D., Kanasaki, K., Sho, R., Kato, Y., Kojima, R., Haneda, M. ja Inomata, N. (2006). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini lievittää munuaisten toimintahäiriön ja fibroosin etenemistä WKY-rotilla, joilla on vakiintunut glomerulonefriitti. Journal of the American Society of Nephrology, 17(3), 674-685. https://doi.org/10.1681/ ASN.2005040385 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16452498/
• Nagai, T., Kanasaki, M., Srivastava, S. P., Nakamura, Y., Ishigaki, Y., Kitada, M., Shi, S., Kanasaki, K. ja Koya, D. (2014). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini estää diabetekseen liittyviä

diabetekseen liittyvä munuaisten fibroosi ja endoteeli-mesenkymaalinen siirtymä. BioMed Research International, 2014, 696475. https://doi.org/10.1155/2014/696475 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24783220/

47. Srivastava, S. P., Goodwin, J. E., Kanasaki, K. ja Koya, D. (2020). Metabolinen uudelleenohjelmointi N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinilla suojaa diabeettiselta munuaissairaudelta. British Journal farmakologia, 177 (16), 3691-3711. https://doi.org/10.1111/bph.15087  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32352559/
48. Carde, P., Chastang, C., Goncalves, E., Mathieu-Tubiana, N., Vuillemin, E., Delwail, V., Corbion, O., Vekhoff, A., Isnard, F., Ferrero, J. M., et al. (1992). [Seraspenidi (asetyyliSDKP): A faasin I-II kliininen tutkimus hematopoieettisesta inhibiittorista, joka suojaa asasykliini- ja ifosfamidi-monokemoterapian toksisuudelta]. Kliininen tutkimus C R Acad Sci III, 315(13), 545-550. PMID: 1300237 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1300237/
49. Cappelaere, P., Hecquet, B., Rolland, F., Meeus, L., Domenge, C., Krakowski, I., De Gislain, C., Chauvergne, J., Dufour-Esquerré, F., Carde, P. (1995). [Satunnaistettu plasebotutkimus luuytimen suojaamisesta goralatidilla potilailla, joilla on ylähengitysteiden ja ruoansulatuskanavan tai ruokatorven levyepiteelisolusyöpä ja joita hoidetaan karboplatiinin ja fluorourasiilin yhdistelmällä]. Bull Cancer, 82(9), 732-737. PMID: 8535033 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8535033/
50. Nitta, K., Shi, S., Nagai, T., Kanasaki, M., Kitada, M., Srivastava, S. P., Haneda, M., Kanasaki, K. ja Koya, D. (2016). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin oraalinen anto parantaa munuaistautia hiirillä, joilla on tyypin 1 ja tyypin 2 diabetes, terapeuttisen hoito-ohjelman avulla. BioMed Research Kansainvälinen, 2016 , 9172157 . https://doi.org/10.1155/2016/9172157  https://  pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27088094/
51. Tan, H., Zhao, J., Wang, S., Zhang, L., Wang, H., Huang, B., Liang, Y., Yu, X. ja Yang, N. (2012). Ac-SDKP heikentää lupusnefriitin etenemistä MRL/lpr-hiirillä. Kansainvälinen immunofarmakologia, 14(4), 401–409. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2012.07.023https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22922317/
52. Maheshwari, M., Romero, C. A., Monu, S. R., Kumar, N., Liao, T. D., Peterson, E. L. ja Carretero,

O. A. (2018). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin (Ac-SDKP) munuaissuojavaikutukset liikalihavilla rotilla runsaasti suolaa sisältävällä ruokavaliolla. American Journal of Hypertension, 31(8), 902-909. https://doi.org/ 10.1093/ajh/hpy052 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29722788/

53. Kamarehei, M., & Zahednasab, H. (2025). Ac-SDKP-peptidin neuroprotektiiviset vaikutukset SH-SY5Y-soluissa ja Parkinsonin taudin rotan mallissa 6-OHDA:n aiheuttamaa oksidatiivista stressiä ja ER-stressiä vastaan. Neuropeptidit, 112, 102534. https://doi.org/10.1016/j.npep.2025.102534 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40544680/
54. Hashemizadeh, S., Pourkhodadad, S., Hosseindoost, S., Pejman, S., Kamarehei, M., Badripour, A., Omidi, A., Pestehei, S. K., Seifalian, A. M. ja Hadjighassem, M. (2022). Ac-SDKP-peptidi parantaa toiminnallista palautumista selkäydinvamman jälkeen prekliinisessä mallissa. Neuropeptidit, 92, 102228. https://doi.org/10.1016/j.npep.2022.102228 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 35101843/
55. Zhang, Y., Zhang, Z. G., Chopp, M., Meng, Y., Zhang, L., Mahmood, A. ja Xiong, Y. (2017). Traumaattisen aivovamman hoito rotilla N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinilla. Journal of

Neurokirurgia, 126(3), 782-795. https://doi.org/10.3171/2016.3.JNS152699  http:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28245754/

56. Pejman, S., Kamarehei, M., Riazi, G., Pooyan, S. ja Balalaie, S. (2020). Ac-SDKP vaimentaa kokeellisen autoimmuunisen enkefalomyeliitin etenemistä estämällä ER- ja oksidatiivista stressiä C57BL/6-hiirten hippokampuksessa. Brain Research Bulletin, 154, 21–31. https://doi.org/10.1016/j.brainresbull.2019.09.014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31589901/
57. Zhang, L., Chopp, M., Teng, H., Ding, G., Jiang, Q., Yang, X. P., Rhaleb, N. E. ja Zhang, Z. G. (2014). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin ja kudosplasminogeeniaktivaattorin yhdistelmähoito antaa voimakkaan neuroprotektiotason rotilla aivohalvauksen jälkeen. Aivohalvaus, 45(4), 1108-1114. https:// doi.org/10.1161/STROKEAHA.113.004399. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24549864/
58. Kim, D. H., Moon, E.-Y., Yi, J. H., Lee, H. E., Park, S. J., Ryu, Y.-K., Kim, H.-C., Lee, S. and Ryu, J.

H. (2015). Timosiini β4-peptidifragmentti lisää neurogeneesiä hippokampuksessa ja helpottaa avaruudellista muistia. Neurotiede, 310, 51-62. https://doi.org/10.1016/j.neuroscience.2015.09.017 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26363149/

59. Wei, A., Zhao, F., Hao, A., Liu, B. ja Liu, Z. (2022). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini (AcSDKP) vaimentaa maksan fibroosia WTAP/m6A/Ptch1-akselin kautta Hedgehog-reitin kautta. Gene, 813, 146125. https://doi.org/10.1016/j.gene.2021.146125 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34921949/
60. Zhang, L., Xu, L. M., Chen, Y. W., Ni, Q. W., Zhou, M., Qu, C. Y. ja Zhang, Y. (2012). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliinin antifibroottinen vaikutus sappiteiden ligation aiheuttamaan maksan fibroosiin rotilla. World Journal of Gastroenterology, 18(37), 5283-5288. https://doi.org/10.3748/wjg.v18.i37.5283 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23066324/
61. Chen, Y. W., Liu, B. W., Zhang, Y. J., Chen, Y. W., Dong, G. F., Ding, X. D., Xu, L. M., Pat, B..,

Fan, J. G. ja Li, D. G. (2010). AcSDKP:n perustason säilyttäminen lieventää hiilitetrakloridin aiheuttamaa maksan fibroosia rotilla. Journal of Hepatology, 53(3), 528-536. https://doi.org/10.1016/ j.jhep.2010.03.027 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20646773/

62. Ameri, Z., Shahabi, A., Farsinejad, A., Sattarzadeh Bardsiri, M., Javedani, H., Bagher, Z., Saraee, A. ja Brouki Milan, P. (2025). Selluloosapohjainen adhesiivinen hydrogeeli, joka sisältää N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyyli-proliinipeptidiä nopeuttamaan haavan paranemista ja estämään arpeutumista in vivo kanin korvan arpimallissa. International Journal of Biological Macromolecules, 322(Pt 1), 144981. https:// doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.144981. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/40480579/
63. Fromes, Y., Liu, J. M., Kovacevic, M., Bignon, J. ja Wdzieczak-Bakala, J. (2006). Asetyyliseriini-asparaginyyli-lysiini-proliinitetrapeptidi parantaa iholäpän selviytymistä ja nopeuttaa haavan paranemista. Haavan korjaus ja Uudistuminen, 14 (3), 306-312. https://doi.org/10.1111/  j.1743-6109.2006.00125.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16808809/
64. Massé, A., Ramirez, L. H., Bindoula, G., Grillon, C., Wdzieczak-Bakala, J., Raddassi, K., Deschamps de Paillette, E., Mencia-Huerta, J. M., Koscielny, S., Potier, P., Sainteny, F. ja Carde,

P. (1998). Asetyyli-N-Ser-Asp-Lys-Pro tetrapeptidi (Goralatidi) suojaa doksorubisiinin aiheuttamalta toksisuudelta: hiiren eloonjäämisen paraneminen ja luuytimen kantasolujen ja esiasteen solujen suojaaminen. Veri, 91(2), 441-449. PMID: 9427696. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427696/

65.Ramasamy, V., Ntsekhe, M. ja Sturrock, E. (2021). N-asetyyli-seryyli-aspartyyli-lysyl-proliini-sekvenssiä sisältävien peptidien fibroosinestopotentiaalin tutkiminen. Kliininen ja kokeellinen farmakologia ja fysiologia, 48(11), 1558-1565. https://doi.org/10.1111/1440-1681.13565 https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/ pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34347311/.

• Leeanansaksiri, W., DeSimone, S. K., Huff, T., Hannappel, E. ja Huff, T. F. (2004). Timosiini-beta

4 ja sen N-terminaalinen tetrapeptidi, AcSDKP, estävät proliferaatiota ja indusoivat dysplastisia, ei-apoptoottisia tumia ja syöttösolujen degranulaatiota. Kemia ja biologinen monimuotoisuus, 1(7), 1091–1100. https://doi.org/10.1002/cbdv.200490081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17191900/