Timozin β4 (timbetazin): kardioprotektivni in anti-aging potencial

Opis možnih učinkov snovi na podlagi literature. (To ni opis izdelka, izjava o omejitvi odgovornosti je na dnu strani)

Timozin β4 (Tβ4), znan tudi kot timbetasin, je majhna beljakovina, ki naravno nastaja v telesu. Sestavljena je iz 43 aminokislin in je zdaj vse bolj priljubljena kot močno in vsestransko terapevtsko sredstvo. V srcu Tβ4 podpira procese zdravljenja na več pomembnih načinov: aktivira programe popravljanja že v zgodnjem življenjskem obdobju (razvoj), pomaga celicam, ki obdajajo srce in žile, da postanejo bolj elastične, zmanjšuje škodljivi oksidativni stres in vnetja ter preprečuje kopičenje brazgotinskega tkiva (fibroza). 

Zgodnje študije na zarodkih in odraslih živalih so pokazale, da lahko dajanje Tβ4 "prebudi" signale za popravilo, ki so običajno aktivni le med razvojem. To vodi do zadebelitve srčne sluznice (razjede), povečanja števila celic, ki se celijo, boljše rasti krvnih žil in boljšega preživetja celic miokarda, tudi brez miokardnega infarkta. Tβ4 je bil preizkušen kot terapevtsko sredstvo v več laboratorijskih (predkliničnih) študijah in študijah na živalih. Ne glede na to, ali se daje intravensko ali v obliki obliža s počasnim sproščanjem, Tβ4 izboljša delovanje srca in poveča število malih krvnih žil po miokardnem infarktu.

Timozin β4 pomaga pri celjenju srca z reaktivacijo embrionalnih programov. Študije na mišjih zarodkih so pokazale, da je naravno aktiven med zgodnjim razvojem srca, kjer pomaga srčnim celicam pri rasti in preživetju [1]. Pri odraslih miših z blokiranimi koronarnimi arterijami (model miokardnega infarkta) je intravensko dajanje tiomozina β4 izboljšalo delovanje srca, pomagalo srčnim celicam preživeti in povečalo rast novih krvnih žil. Zanimivo je, da so injekcije tiomozina β4 tudi v zdravih srcih odraslih oseb brez poškodb povzročile strukturne in molekularne spremembe v zunanji plasti srca (amnijski membrani), ki so bile podobne spremembam, opaženim med razvojem. Te so vključevale aktivacijo nekaterih matičnim celicam podobnih celic in vključitev genov, ki se običajno pojavijo le med nastajanjem srca. Do teh učinkov je prišlo brez pomanjkanja kisika, kar pomeni, da lahko samo timozin β4 aktivira naravne sisteme za obnovo telesa. Na podlagi teh rezultatov se zdi, da je timozin β4 obetaven za zdravljenje starostnih poškodb tkiva in regeneracijo srčnega tkiva.

Timozin β4 pospešuje obnovo srca in žil po poškodbah. Shrivastava et al. (2010) so poudarili sposobnost timozina β4, da ščiti srčne celice po poškodbi, spodbuja rast novih krvnih žil in spodbuja srcu lastne matične celice [2]. Tudi brez poškodbe je povzročil zadebelitev epikarda ter povečal populacijo srčnih progenitornih celic in krvnih žil. To pomeni, da njegov terapevtski učinek ni le odziv na poškodbo. Je prva molekula, za katero je bilo dokazano, da ob vbrizgavanju v krvni obtok aktivira obnovo miokarda in žilja, zato je obetavno sredstvo za zdravljenje bolezni srca, ki jih povzroča nizka raven kisika.

Da bi timozin β4 bolje deloval na mestih poškodb srca, je Huang et al. (2017) ustvarili nanodelce, označene z majhnim peptidom CREKA, ki se veže na krvne strdke v poškodovanem srčnem tkivu [3]. Te modificirane molekule (CNP-Tβ4) so prenašale timozin β4 neposredno na poškodovana mesta. V laboratorijskih testih so se veliko bolje vezale na fibrinske strdke kot neciljane različice. Pri živih miših s poškodovanim srcem je ciljani tiomozin β4 učinkoviteje dosegel poškodovano tkivo, tam ostal dlje in pomagal pri popravilu srca bolje kot neciljane oblike. Ti rezultati kažejo, da lahko ciljno usmerjanje timozina β4 posebej na mesta poškodb izboljša njegove terapevtske lastnosti.

V drugi študiji je Spurney et al. (2010) so testirali timozin β4 na mišjem modelu mišične distrofije Duchenne (t. i. mouse mdx), da bi ugotovili, ali lahko pomaga pri regeneraciji mišic in izboljša moč [4]. Samice miši mdx in zdrave kontrolne miši so šest mesecev prejemale injekcije timozina β4 (150 μg, dvakrat tedensko), pri čemer so bile izpostavljene vadbi, ki je poslabšala simptome. V obnavljajočih se mišičnih vlaknih so odkrili tiomozin β4, ki je povečal število novih mišičnih celic, kar kaže, da je pomagal tkivom pri obnovi. Vendar se te koristi niso odrazile v krepitvi mišic ali izboljšanju delovanja srca, prav tako se brazgotinjenje ni zmanjšalo. Čeprav je torej izboljšala videz tkiv pod mikroskopom, v tem dolgoročnem poskusu pri uporabljenem odmerku in urniku ni privedla do funkcionalnega izboljšanja.

Timozin β4 poveča učinek zdravljenja z matičnimi celicami po miokardnem infarktu. Ye in drugi (2013) so raziskovali, ali lahko timozin β4 v obliki podaljšanega sproščanja poveča učinkovitost prašičjih mezenhimskih matičnih celic (sMSC), ko so obe snovi dajali prek fibrinskega obliža pri podganah po miokardnem infarktu (miokardni infarkt) [5]. V laboratorijskih poskusih v pogojih z nizko vsebnostjo kisika je dodatek 1 µg/ml timozina β4 zaščitil celice z zmanjšanjem označevalcev celične smrti, kot so uhajanje laktatne dehidrogenaze, pozitivne celice TUNEL in aktivnost kaspaze-8. Povečal je tudi raven Bcl-xL, beljakovine, ki pomaga celicam preživeti. Pri živih živalih je bilo delovanje srca po 4 tednih bistveno boljše v skupini, ki je prejemala tako sMSC kot timozin β4, pri čemer je bil iztisni delež levega prekata (LVEF) 51,7%, frakcijsko skrajšanje pa 26,7%. Poškodovana srčna stena je bila tudi bistveno debelejša, dvakrat debelejša kot pri nezdravljenih živalih. To je matičnim celicam pomagalo preživeti in ostati v srcu dlje časa, spodbujalo je rast novih krvnih žil in privabilo naravne srčne matične celice (c-Kit⁺ ) na poškodovano območje [5].

Zanimivo je, da timozin β4 ponovno zažene programe obnove srca, ki so jih opazili med razvojem. Smart et al. (2007) so ugotovili, da ima timozin β4 pomembno vlogo med embrionalnim razvojem srca, zlasti pri gradnji srčnih krvnih žil [6]. To se zgodi s spodbujanjem migracije epikardialnih celic (EPDC) in njihovega preoblikovanja v gladke mišične in endotelne celice. V odraslem srcu miokard izloča timozin β4, ki nato reaktivira neaktivni epikard. To povzroči premikanje in preoblikovanje celic, označenih z epikardinom, v druge podporne celice, vključno s fibroblasti in žilnimi celicami ( ). Ti učinki so bili opaženi v tkivnih kulturah in pri živih živalih. Deluje tako, da spremeni notranjo strukturo celice, s čimer EPDC-jem povrne sposobnost spreminjanja in selitve. To podpira preživetje srčnih celic, rast novih krvnih žil in splošno obnovo miokarda po poškodbi [6].

Poleg tega timozin β4 ščiti srčne fibroblaste pred oksidativnimi poškodbami. Kumar in Gupta (2011) sta v študiji s srčnimi fibroblasti novorojenih podgan, izpostavljenimi vodikovemu peroksidu (vir oksidativnega stresa), dokazala, da je zmanjšal količino škodljivih reaktivnih kisikovih vrst (ROS) v celicah [7]. Povečal je tudi raven zaščitnih encimov, kot sta Cu/Zn-superoksidna dismutaza (SOD) in katalaza, zmanjšal razmerje Bax/Bcl-2 (kar kaže na zmanjšanje celične smrti) in zmanjšal izražanje genov, povezanih s fibrozo (CTGF, kolagen I in III). Ko smo te encime namerno utišali s siRNA, so celice postale bolj dovzetne za smrt, vendar jih je timozin β4 še naprej ščitil. To kaže, da ima timozin β4 več načinov zaščite srčnih fibroblastov pred oksidativnim stresom in zaustavljanja škodljivih procesov fibroze.

Timozin β4 ščiti srčne mišične celice pred oksidativnim stresom. Wei in drugi (2012) so preučevali miokardne celice novorojenih podgan in ugotovili, da je zmanjšal raven ROS ter povečal izražanje mRNA in beljakovin Cu/Zn-SOD in katalaze [8]. Povečal je tudi raven preživetvenih beljakovin, kot je Bcl-2, hkrati pa zmanjšal razmerje Bax/Bcl-2, ki spodbuja celično smrt. Hkrati je povečal aktivnost protivnetnih genov. Tudi ko sta bila zaščitna encima Cu/Zn-SOD in katalaza blokirana, je timozin β4 še vedno preprečil celično smrt, kar dokazuje, da za zaščito srčnih celic pred poškodbami uporablja več prekrivajočih se strategij.

Poleg tega timozin β4 na več načinov spodbuja celjenje srca in preprečuje brazgotinjenje. Gupta in drugi (2012) so ugotovili, da izboljšuje zdravje srca s hkratnim delovanjem na več bioloških poti [9]. V laboratorijskih študijah in na živih modelih poškodb srca je pomagal obnoviti delovanje srca, zmanjšati vnetje in zmanjšati brazgotinjenje (fibrozo). Ena od ključnih poti, ki jih je aktiviral, je PI3K/Akt, za katero je znano, da spodbuja preživetje celic in obnovo tkiv. Timozin β4 je podpiral tudi beljakovinski kompleks, imenovan ILK-Pinch-Parvin, ki pomaga celicam ohranjati strukturno stabilnost, in blokiral NF-κB, molekulo, ki povzroča vnetje, ter gene, odgovorne za prekomerno tvorbo kolagena, ki je glavni vzrok za brazgotinjenje srca. V srčnih podpornih celicah, imenovanih fibroblasti, je zmanjšal škodljive molekule, imenovane reaktivne kisikove vrste (ROS), okrepil naravne antioksidativne encime, kot sta Cu/Zn-superoksidna dismutaza (SOD) in katalaza, ter spodbujal izražanje genov, ki pomagajo celicam preživeti. Hkrati je zaviral gene, ki so odgovorni za togost tkiva in fibrozo.

Timozin β4 zmanjšuje brazgotinjenje in izboljšuje rast krvnih žil. Cavasin (2006) je pregledal laboratorijske študije in študije na živalih, ki so pokazale, da pomaga celicam srčne mišice preživeti in se gibati, njegov aktivni fragment, Ac-SDKP, pa zmanjšuje brazgotinjenje srca (fibrozo) pri podganah z visokim krvnim tlakom ter zmanjšuje vnetje in brazgotinjenje po infarktu miokarda pri drugih modelih [10]. Ac-SDKP je pomagal tudi pri oblikovanju novih krvnih žil in zmanjšal tveganje za razpoko srčne stene po miokardnem infarktu pri miših. Vse te prednosti, kot so manjše vnetje, manjše brazgotinjenje, boljši pretok krvi in močnejša miokarda, skupaj kažejo, da lahko te spojine preprečijo dolgoročne poškodbe po miokardnem infarktu. Vendar je v pregledu navedeno, da so še vedno potrebne študije na ljudeh.

Raziskave so pokazale, da je po zdravljenju s timozinom β4 manj razpok srca in boljše delovanje srca. Pri miših, ki so preživele srčni infarkt, so Peng et al. (2014) dajali timozin β4 z majhno črpalko, nameščeno pod kožo [11]. Zdravljenje je trajalo od enega do pet tednov. Zmanjšalo je število raztrganin miokarda, zmanjšalo vnetje, zmanjšalo število umirajočih srčnih celic in izboljšalo strukturo srca. Po petih tednih je povečalo tudi rast malih krvnih žil in povzročilo izboljšanje črpalne moči srca. Ti rezultati kažejo, da lahko timozin β4 zmanjša poškodbe in spodbuja celjenje po miokardnem infarktu. Poleg tega timozin β4 aktivira rast krvnih žil iz epikarda. Smart in drugi (2010) so se osredotočili na to, kako deluje na zunanjo plast srca, imenovano epikardij [12]. Običajno ima srce po poškodbi omejeno sposobnost tvorjenja novih krvnih žil. Vendar je s timozinom β4 epikardij tvoril več krvnih žil, ki so se dobro povezale s srčnim obtokom, zlasti po miokardnem infarktu. To se je zgodilo, ker so bile epikardialne celice s timozinom β4 reprogramirane, da so postale celice, ki tvorijo žile. Ti rezultati kažejo, da lahko s spodbujanjem epikardialnih celic aktivira srcu lasten obnovitveni sistem.

Poleg tega so Hinkel in drugi (2018) v obsežnem pregledu pokazali, da izboljšuje rast žil in delovanje srca pri živalih z boleznimi srca, vključno z mišmi in prašiči [13]. Pri prašičih s sladkorno boleznijo ali visokim holesterolom je gensko zdravljenje s timozinom β4 izboljšalo tudi pretok krvi in delovanje srca. Deloval je tako, da je spodbujal preživetje in delovanje srčnih celic in krvnih žil, zmanjševal vnetja in spodbujal regeneracijo. Pregled je potrdil, da je gensko zdravljenje s timozinom β4 obetavno dolgoročno zdravljenje bolezni srca. Timozin β4 pomaga srcu pri celjenju, saj nadzoruje vnetja in zmanjšuje brazgotinjenje po srčnem infarktu. Raziskovalci so ugotovili, da oksidirana oblika timozina β4, imenovana Tβ4-sulfoksid (Tβ4-SO), pomaga srcu in drugim tkivom pri celjenju, saj nadzoruje vnetje in zmanjšuje brazgotinjenje [14]. To so v laboratoriju preizkusili na poškodovanih plavutih in srcih zebric, mišjih modelih poškodb srca in gojenih človeških imunskih celicah. Pri zebrici je Tβ4-SO deloval po signalih vodikovega peroksida (H₂O₂), ki jih je povzročila poškodba, in pomagal odstraniti imunske celice (makrofage) iz rane. Odstranitev makrofagov je pospešila celjenje. Pri miših s poškodbo srca je to zmanjšalo število makrofagov v srcu, spodbudilo boljše celjenje tkiva in povzročilo manjše brazgotine, kar kaže na manjše dolgotrajno vnetje, ki običajno vodi v fibrozo. V laboratorijskih testih s človeškimi celicami T in monociti je Tβ4-SO zmanjšal vnetne signale, kot je interferon gama (IFN-γ), razpršil imunske celice in povzročil njihovo programirano smrt - domnevno prek signalizacije superoksida.

Druga študija je pokazala, da dodajanje dodatnega timozina β4 z genskim zdravljenjem (AAV-Tβ4) pomaga zaščititi srce po miokardnem infarktu (miokardni infarkt ali MI). V tem poskusu so miši doživele miokardni infarkt zaradi zapore koronarne arterije in nato prejele injekcijo tiomozina β4, ki so ga vnesli prek virusnega vektorja (AAV). Poleg tega so bile opravljene laboratorijske študije na miokardnih celicah (kardiomiocitih), izpostavljenih oksidativnemu stresu, in celicah, ki proizvajajo brazgotine (miofibroblasti), izpostavljenih TGF-β1. Po miokardnem infarktu se je pri miših naravno povečala raven timozina β4, vendar je dajanje več timozina β4 prek AAV-Tβ4 izboljšalo delovanje srca, zmanjšalo oksidativno škodo in oslabilo vnetje, vključno z zmanjšanjem aktivnosti inflammasoma. Zmanjšala se je tudi količina kolagena in fibroze v srčnem tkivu. V srčnih celicah je pomagal obnoviti zaščitni proces, imenovan mitofagija, ki ohranja zdrave mitohondrije in je bistven za močne srčne kontrakcije. V celicah, ki tvorijo brazgotine, je upočasnil njihovo rast in blokiral njihovo aktivacijo s TGF-β1, ki je ključni dejavnik fibroze.

Zaključek: zakaj je timozin β4 pomemben za celjenje srca?

Timozin β4 je majhna molekula z velikim učinkom. Ščiti srčne celice, pomaga pri nastajanju novih krvnih žil in preprečuje nastanek brazgotin. Najpomembneje pa je, da aktivira močne programe za obnovo v zgodnjem odraslem srcu. Zato je potencialna možnost ne le za zdravljenje po srčnem infarktu, temveč tudi za ohranjanje zdravja srca v starosti. Pri številnih modelih poškodb srca ponovno vzpostavi elastičnost srčne sluznice in krvnih žil, ščiti mišice in podporne celice pred stresom ter zmanjšuje brazgotinjenje, ki oslabi srce. Ti učinki pomagajo zgostiti poškodovano srčno steno, izboljšati delovanje srca in zmanjšati tveganje za resne težave, kot je razpoka stene po srčnem infarktu. Posebej vznemirljivo je dejstvo, da lahko v odraslem srcu vključi zgodnje signale za popravilo. Naslednji izziv je pretvoriti ta močan biološki potencial v dejanske, trajnostne rezultate z dobro zasnovanimi kliničnimi preskušanji. Vendar pa morajo raziskovalci bolje uskladiti procese strukturnega popravljanja z dejanskim izboljšanjem delovanja srca pri različnih boleznih. Neprepričljivi rezultati pri mišični distrofiji nas opozarjajo, da so pomembni čas, odmerek in vrsta poškodbe srca.

Izjava o omejitvi odgovornosti

Ta članek je bil napisan v izobraževalne namene in je namenjen ozaveščanju o obravnavani snovi. Pomembno je opozoriti, da članek govori o snovi na splošno - ni opis določenega izdelka (kemijskega reagenta). Ne predlagamo uporabe kemičnih reagentov na ljudeh - to je zakonsko prepovedano, saj mora biti izdelek za uporabo za zdravljenje registriran kot zdravilo. Informacije v besedilu temeljijo na razpoložljivih znanstvenih študijah in niso namenjene kot zdravniški nasvet ali spodbujanje samozdravljenja. Bralec se mora pri vseh odločitvah o zdravju in zdravljenju posvetovati z usposobljenim zdravstvenim delavcem.

Reference

1. Bock-Marquette, I., Maar, K., Maar, S., Lippai, B., Faskerti, G., Gallyas, F. Jr, Olson, E. N. in Srivastava, D. (2023). Timozin beta-4 določa nove usmeritve za razvoj učinkovitih regenerativnih terapij proti staranju. Mednarodna imunofarmakologija, 116, 109741. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2023.109741 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36709593/
2. Shrivastava, S., Srivastava, D., Olson, E. N., DiMaio, J. M. in Bock-Marquette, I. (2010). Timozin beta4 in regeneracija srca. Letopis newyorške akademije znanosti, 1194, 87-96. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2010.05468.xhttps://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20536454/ 
3. Huang, Z., Song, Y., Pang, Z., Zhang, B., Yang, H., Shi, H., Chen, J., Gong, H., Qian, J. in Ge, J. (2017). Usmerjena dostava timozina beta 4 v poškodovani miokard z uporabo nanodelcev, konjugiranih s CREKA. International Journal of Nanomedicine, 12, 3023-3036. https://doi.org/10.2147/IJN.S131949 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28442910/  
4. Spurney, C. F., Cha, H. J., Sali, A., Pandey, G. S., Pistilli, E., Guerron, A. D., Gordish-Dressman, H., Hoffman, E. P. in Nagaraju, K. (2010). Ocena delovanja skeletnih in srčnih mišic po dolgotrajnem dajanju timozina beta-4 mišim s pomanjkanjem distrofina. PLoS ONE, 5(1), e8976. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0008976https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20126456/ 
5. Ye, L., Zhang, P., Duval, S., Su, L., Xiong, Q. in Zhang, J. (2013). Timozin β4 povečuje učinkovitost presajenih mezenhimskih matičnih celic pri obnovi miokarda. Kroženje, 128(11 Suppl 1), S32-S41. https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.112.000025https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24030419/ 
6. Smart, N., Risebro, C. A., Melville, A. A. D., Moses, K., Schwartz, R. J., Chien, K. R. in Riley, P. R. (2007). Timozin beta-4 je bistven za razvoj koronarnih žil in spodbuja neovaskularizacijo skozi epikard odraslega človeka. Letopis newyorške akademije znanosti, 1112, 171-188. https://doi.org/10.1196/annals.1415.000 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17495252/
7. Kumar, S., & Gupta, S. (2011). Timozin beta 4 preprečuje oksidativni stres z delovanjem na antioksidativne in anti-apoptotične gene v srčnih fibroblastih. PLoS ONE, 6(10), e26912. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0026912 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22046407/
8. Wei, C., Kumar, S., Kim, I.-K. in Gupta, S. (2012). Timozin beta 4 ščiti kardiomiocite pred oksidativnim stresom z delovanjem na antioksidativne encime in anti-apoptotične gene. PLoS ONE, 7(8), e42586. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0042586 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22880044/
9. Gupta, S., Kumar, S., Sopko, N., Qin, Y., Wei, C. in Kim, I.-K. (2012). Timozin β4 in zaščita srca: učinki na vnetje in fibrozo. Annals of the New York Academy of Sciences, 1269, 84–91. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2012.06752.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23045975/
10. Cavasin, M. A. (2006). Terapevtski potencial timozina beta4 in njegovega derivata N-acetil-seril-aspartil-lizil-prolina (Ac-SDKP) pri zdravljenju srca po miokardnem infarktu. American Journal of Cardiovascular Drugs, 6(5), 305–311. https://doi.org/10.2165/00129784-200606050-00003 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17083265/
11. Peng, H., Xu, J., Yang, X.-P., Dai, X., Peterson, E. L., Carretero, O. A., & Rhaleb, N.-E. (2014). Timozin-β4 preprečuje razpoko srca in izboljša delovanje srca pri miših z miokardnim infarktom. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 307(5), H741-H751. https://doi.org/10.1152/ajpheart.00129.2014 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25015963/
12. Smart, N., Risebro, C. A., Clark, J. E., Ehler, E., Miquerol, L., Rossdeutsch, A., Marber, M. S. in Riley, P. R. (2010). Timozin beta4 pospešuje epikardialno neovaskularizacijo v poškodovanem odraslem srcu. Annals of the New York Academy of Sciences, 1194, 97-104. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2010.05478.x https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20536455/
13. Hinkel, R., Klett, K., Bähr, A. in Kupatt, C. (2018). Zaščitni učinki timozina β4 v srcu. Strokovno mnenje o biološki terapiji, 18(sup1), 121–129. https://doi.org/10.1080/14712598.2018.1490409 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30063857/
14. Evans, M. A., Smart, N., Dubé, K. N., Bollini, S., Clark, J. E., Evans, H. G., Taams, L. S., Richardson, R., Lévesque, M., Martin, P., Mills, K., Riegler, J., Price, A. N., Lythgoe, M. F. in Riley, P. R. (2013). Timozin β4-sulfoksid zmanjšuje infiltracijo vnetnih celic in spodbuja celjenje srčnih ran. Nature Communications, 4, 2081. https://doi.org/10.1038/ncomms3081 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23820300/
15. Wang, F., He, Y., Yao, N., Ruan, L. in Tian, Z. (2022). Timozin β4 ščiti pred poškodbami srca in posledično fibrozo srca pri miših z miokardnim infarktom. Kardiovaskularna terapija, 2022, 1308651. https://doi.org/10.1155/2022/1308651 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35712678/